24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1491  |  回复: 5

琪瑶儿

金虫 (小有名气)

[求助] 做土壤微生物样品的16s rDNA pcr 为什么会出现两条带??引物27f 1492r已有5人参与

想做土壤微生物样品的16s 克隆文库,结果用27f 1492r pcr产物两条带, 一条在1500bp 为目的条带,另外一条在100-250之间 ,这是什么原因,我需要怎么调整才能进行下一步实验?
回复此楼
海洋环境微生物《DGGE,海洋污染修复
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gutong1117

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-07 15:40:26
99%的可能性是被污染了。BUFF,NTP,酶,水全部都换成新的。如果LZ想知道是哪里污染了可以一个个试。
2楼2014-05-07 11:18:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

litongtongti

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-07 15:40:32
小的片段是引物二聚体吧,提高下退货温度试试。或者你切胶回收目的片段,感觉没什么影响!
3楼2014-05-07 15:34:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Donnawang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也觉得可能是引物二聚体,不影响,
4楼2014-06-16 09:32:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无懈可击萍

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也觉得小的那条应该是引物二聚体,不影响后续实验~
5楼2014-08-22 19:23:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

打败番茄炒蛋

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是引物二聚体,可以适当调整加入的引物量,对目的条带可以切胶回收纯化
天生自弃难丽质
6楼2015-04-20 14:27:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 琪瑶儿 的主题更新
信息提示
请填处理意见