24小时热门版块排行榜    

查看: 1848  |  回复: 5

琪瑶儿

金虫 (小有名气)

[求助] 做土壤微生物样品的16s rDNA pcr 为什么会出现两条带??引物27f 1492r 已有5人参与

想做土壤微生物样品的16s 克隆文库,结果用27f 1492r pcr产物两条带, 一条在1500bp 为目的条带,另外一条在100-250之间 ,这是什么原因,我需要怎么调整才能进行下一步实验?
回复此楼
海洋环境微生物《DGGE,海洋污染修复
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gutong1117

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-07 15:40:26
99%的可能性是被污染了。BUFF,NTP,酶,水全部都换成新的。如果LZ想知道是哪里污染了可以一个个试。
2楼2014-05-07 11:18:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

litongtongti

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-07 15:40:32
小的片段是引物二聚体吧,提高下退货温度试试。或者你切胶回收目的片段,感觉没什么影响!
3楼2014-05-07 15:34:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Donnawang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也觉得可能是引物二聚体,不影响,
4楼2014-06-16 09:32:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无懈可击萍

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也觉得小的那条应该是引物二聚体,不影响后续实验~
5楼2014-08-22 19:23:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

打败番茄炒蛋

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是引物二聚体,可以适当调整加入的引物量,对目的条带可以切胶回收纯化
天生自弃难丽质
6楼2015-04-20 14:27:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 琪瑶儿 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +5 process2012 2026-08-23 6/300 2026-08-25 08:44 by 白大多亮
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 明天应该可查了!? +5 chengyan1220 2026-08-23 5/250 2026-08-24 23:28 by 我4大白菜
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见