24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1005  |  回复: 2

119904386

铁虫 (小有名气)

[求助] 16s引物扩增大肠杆菌,产物不是1500,而是在700上下各有一条带

用的是这对引物:
16s-F:5-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3
16s-R:5-AAGGAGGTGATCCAGCCGCA-3

开始是因为拿这对引物扩增芽孢杆菌得不到目的条带,直接做的菌液PCR,未煮沸也没提取DNA。于是就怀疑芽孢菌是不是形成芽孢后95度预变性破坏不了菌体(预变性10min还是不行),无法释放出DNA模板。所以,想拿G-菌(大肠杆菌)做个对照。奇怪的是,大肠杆菌的扩增产物并不是1.5kb,而是在marker 700bp上下各有一条带(也许加起来1.5kb),同时芽孢菌还是没有带

求解
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

志子

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+4, good! 2013-06-11 12:43:28
预变性时间、退火温度、引物用量是主要影响因素,可从这几方面去做正交试验探索。
菌没有完全裂解,则试沸水浴或延长预变性时间。
引物如果反复冻融的话有可能会裂解断裂。
菌株的遗传性状不稳定,或许在传代的过程中产生了突变;菌株不纯,体系中出现了污染也有可能的。导致模板不纯。
菌株正常,会不会是引物浓度太高,如果引物的浓度很高产生引物二聚体的概率就比较高。
2楼2013-06-10 22:52:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肥猫p

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我是用341f和907r
3楼2013-06-12 10:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 119904386 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 280求调剂 +18 咕噜晓晓 2026-04-02 19/950 2026-04-04 01:03 by userper
[考研] 化学调剂求助 +6 LULONG1 2026-04-03 6/300 2026-04-03 23:13 by qzxyhcsy
[考研] 考研调剂 +3 15615482637 2026-04-03 3/150 2026-04-03 22:50 by ms629
[考研] 317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂 +6 YinTai 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:30 by 无际的草原
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿郑州大学材料与化工085600,求调剂 +17 吃的不少 2026-04-02 17/850 2026-04-03 21:48 by qlm5820
[考研] 266求调剂 +18 阳阳哇塞 2026-04-01 18/900 2026-04-03 18:38 by zllcz
[考研] 五邑大学土木工程招调剂生2026 +3 wyutj 2026-03-31 4/200 2026-04-03 18:21 by zengxj_7201
[考研] 330求调剂 +3 白神呜呼呼 2026-04-02 3/150 2026-04-03 10:15 by 蓝云思雨
[考研] 材料调剂 +7 一样YWY 2026-04-02 7/350 2026-04-02 21:49 by dongzh2009
[考研] +4 雾与海 2026-04-02 5/250 2026-04-02 19:16 by 土木硕士招生
[考研] 413求调剂 +3 柯某某 2026-03-31 3/150 2026-04-02 16:59 by zzsw+
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 9/450 2026-04-02 12:09 by ms629
[考研] 考研调剂 +12 Amber00 2026-03-31 12/600 2026-04-02 09:04 by sanrepian
[考研] 材料求调剂 +8 呢呢妮妮 2026-04-01 8/400 2026-04-02 07:13 by yjolah
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕 +7 @taotao 2026-03-30 7/350 2026-04-01 14:30 by chenqifeng666
[考研] 环境工程 085701,267求调剂 +15 minht 2026-03-29 16/800 2026-04-01 10:13 by li_sujuan99
[考研] 0856调剂 +7 曲听筠 2026-03-30 7/350 2026-04-01 08:51 by JourneyLucky
[考研] 求收留 +8 1943443204 2026-03-28 8/400 2026-03-31 15:00 by -迷了路啊路
[考研] 296求调剂 +10 彼岸t 2026-03-29 10/500 2026-03-30 10:50 by 探123
信息提示
请填处理意见