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zcf1990

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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在线: 8.2小时
虫号: 2114416
注册: 2012-11-08
专业: 生物化学

[求助] 请教：我的蛋白表达出来了，可溶，但为什么大部分都是没有活性的?

请教两个问题：我的蛋白是pEt系统的，带his标签，表达出来了在上清，也纯化出来了，目的蛋白浓度很高，但活性很差（当然表达条件我已经优化了：37度过夜），我就怀疑是不是表达出来的目的蛋白部分（应该是大部分，不是全部）失活了。我想请教的是，可能是哪些原因造成我的蛋白部分失活以及怎样改进呢？希望大家能帮我，谢谢！

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1楼2013-06-03 10:40:22

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葳蕤小小

新虫 (初入文坛)

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注册: 2013-03-08

我也是纯化一个结合二价铁离子的蛋白，pET载体，his标签，浓度也很高，就是透析完后做EMSA一直没有活性。。。

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

15楼2014-10-17 15:51:57

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