24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 5712  |  回复: 5

小鼹鼠

木虫 (小有名气)

[求助] 沉淀和上清是什么意思啊?

弱弱地问一句,每次做蛋白胶的时候,要跑沉淀和上清,请问沉淀和上清分别是什么?为什么要看是在沉淀还是上清里表达?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

天道酬勤
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
细胞破碎后,离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体,上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说,表达的蛋白要有活性,都是以可溶性蛋白的形式存在,在沉淀中的包涵体,是错误折叠的蛋白,没有活性。
2楼2012-10-22 20:19:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小鼹鼠

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hippo_li at 2012-10-22 20:19:39
细胞破碎后,离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体,上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说,表达的蛋白要有活性,都是以可溶性蛋白的形式存在,在沉淀中的包涵体,是错误折叠的蛋白,没有活性。

谢谢!
天道酬勤
3楼2012-10-22 20:30:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangqq8282

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上清是离心后上面清清的液体
4楼2012-10-22 20:36:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jimmy7633

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.有些蛋白是分泌性的,所以你离心后,蛋白在上清里。
2.大部分蛋白是非分泌性的,你离心后,但还还是在细胞里,即沉淀中。
5楼2012-10-23 10:22:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古月问你哦

铜虫 (小有名气)

不是啊,,沉淀是沉淀,是包涵体,但是包涵体也是可溶性的,包涵体复性得到的蛋白活性没有保证,上清一定是可溶性的,在原核表达中上清的得到的蛋白是有活性的,但是在原核表达中,很多蛋白是得不到上清的,如果上清中有很好,没有只能纯化包涵体,只是蛋白没有活性保证,有人可以接受有人不可有接受,但是上清又没有,那只能采取其他办法,比如用酵母表达或做瞬时转染表达在真核体内得到活性蛋白
我就是我,是不一样的烟火
6楼2015-10-29 11:40:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小鼹鼠 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿矿大,材料工程专硕314分,0856可调都可以 +14 无懈可击的巨人 2026-04-09 14/700 2026-04-10 08:10 by Sammy2
[考研] 283求调剂,工科! +8 苏打水7777 2026-04-08 8/400 2026-04-09 20:50 by xujun0624
[考研] 070300化学 求调剂 +13 73372112 2026-04-08 13/650 2026-04-09 20:22 by maddjdld
[考研] 一志愿085404,总分291,四级已过,求调剂 +10 阿俊阿俊阿俊 2026-04-04 12/600 2026-04-09 16:18 by lin-da
[考研] 材料295 +15 小英11 2026-04-03 16/800 2026-04-09 15:44 by only周
[考研] 0860004 求调剂 309分 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 14:06 by ditto77778
[考研] 一志愿西南大学生物学学硕344 求生物学相关调剂/生物与医药 +7 超人不会飞@ 2026-04-08 7/350 2026-04-09 09:35 by gong120082
[考研] 331求调剂 +5 luoxin0706. 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:15 by zhouyuwinner
[考研] 277求调剂 +4 考研调剂lxh 2026-04-06 6/300 2026-04-08 10:40 by 逆水乘风
[考研] 363求调剂 +9 zh096 2026-04-04 9/450 2026-04-07 21:51 by 418490947
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +11 大火山小火山 2026-04-05 11/550 2026-04-06 22:55 by yunlongyang
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +10 cs0106 2026-04-05 12/600 2026-04-06 19:41 by 无际的草原
[考研] 22408 331分求调剂 +4 y__1 2026-04-06 4/200 2026-04-06 17:26 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕,求调剂,接受其他专业083200 +4 what张 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:07 by chw1980_0
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-04 4/200 2026-04-05 09:44 by zhq0425
[考研] 085602调剂 初试总分335 +12 19123253302 2026-04-04 12/600 2026-04-05 08:08 by 544594351
[考研] 322求调剂 +6 FZAC123 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:23 by 科研小专家
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 考研调剂 +5 小sun要好运 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:43 by 啵啵啵0119
[考研] 本科985,专业0812分336求调剂 +4 莫莫很行 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:31 by zhq0425
信息提示
请填处理意见