应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 沉淀和上清是什么意思啊？
61/1返回列表
查看: 6114  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小鼹鼠

木虫 (小有名气)

[求助] 沉淀和上清是什么意思啊？

弱弱地问一句，每次做蛋白胶的时候，要跑沉淀和上清，请问沉淀和上清分别是什么？为什么要看是在沉淀还是上清里表达？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
天道酬勤
1楼 2012-10-22 19:49:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞破碎后，离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体，上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说，表达的蛋白要有活性，都是以可溶性蛋白的形式存在，在沉淀中的包涵体，是错误折叠的蛋白，没有活性。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-10-22 20:19:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小鼹鼠

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hippo_li at 2012-10-22 20:19:39
细胞破碎后，离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体，上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说，表达的蛋白要有活性，都是以可溶性蛋白的形式存在，在沉淀中的包涵体，是错误折叠的蛋白，没有活性。

谢谢！
回复此楼
天道酬勤
3楼2012-10-22 20:30:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangqq8282

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上清是离心后上面清清的液体
赞一下 回复此楼
4楼2012-10-22 20:36:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jimmy7633

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.有些蛋白是分泌性的，所以你离心后，蛋白在上清里。
2.大部分蛋白是非分泌性的，你离心后，但还还是在细胞里，即沉淀中。
赞一下 回复此楼
5楼2012-10-23 10:22:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古月问你哦

铜虫 (小有名气)
不是啊，，沉淀是沉淀，是包涵体，但是包涵体也是可溶性的，包涵体复性得到的蛋白活性没有保证，上清一定是可溶性的，在原核表达中上清的得到的蛋白是有活性的，但是在原核表达中，很多蛋白是得不到上清的，如果上清中有很好，没有只能纯化包涵体，只是蛋白没有活性保证，有人可以接受有人不可有接受，但是上清又没有，那只能采取其他办法，比如用酵母表达或做瞬时转染表达在真核体内得到活性蛋白
赞一下 回复此楼
我就是我，是不一样的烟火
6楼2015-10-29 11:40:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小鼹鼠 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 PbwVEMK5haaE 2026-08-25 5/250 2026-08-26 05:09 by cNXvBfCpiZOM
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Qj98d49dHFb9 2026-08-25 5/250 2026-08-26 04:57 by cNXvBfCpiZOM
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 7K1CJE38xLG4 2026-08-25 4/200 2026-08-26 02:04 by cNXvBfCpiZOM
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +18 angus9576 2026-08-25 22/1100 2026-08-26 00:41 by merchancy
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+4 1234567wang 2026-08-24 10/500 2026-08-25 19:15 by lfy8008
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +20 羊腰板 2026-08-21 23/1150 2026-08-25 16:34 by zsna
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +17 kkkl_v 2026-08-19 18/900 2026-08-25 09:41 by windflowerwy
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 科研孤儿太难了 +18 我4大白菜 2026-08-20 19/950 2026-08-24 09:47 by 凯恩广盛催化分�
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭