应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 沉淀和上清是什么意思啊？
61/1返回列表
查看: 6092  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小鼹鼠

木虫 (小有名气)

[求助] 沉淀和上清是什么意思啊？

弱弱地问一句，每次做蛋白胶的时候，要跑沉淀和上清，请问沉淀和上清分别是什么？为什么要看是在沉淀还是上清里表达？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
天道酬勤
1楼 2012-10-22 19:49:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞破碎后，离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体，上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说，表达的蛋白要有活性，都是以可溶性蛋白的形式存在，在沉淀中的包涵体，是错误折叠的蛋白，没有活性。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-10-22 20:19:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小鼹鼠

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hippo_li at 2012-10-22 20:19:39
细胞破碎后，离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体，上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说，表达的蛋白要有活性，都是以可溶性蛋白的形式存在，在沉淀中的包涵体，是错误折叠的蛋白，没有活性。

谢谢！
回复此楼
天道酬勤
3楼2012-10-22 20:30:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangqq8282

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上清是离心后上面清清的液体
赞一下 回复此楼
4楼2012-10-22 20:36:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jimmy7633

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.有些蛋白是分泌性的，所以你离心后，蛋白在上清里。
2.大部分蛋白是非分泌性的，你离心后，但还还是在细胞里，即沉淀中。
赞一下 回复此楼
5楼2012-10-23 10:22:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古月问你哦

铜虫 (小有名气)
不是啊，，沉淀是沉淀，是包涵体，但是包涵体也是可溶性的，包涵体复性得到的蛋白活性没有保证，上清一定是可溶性的，在原核表达中上清的得到的蛋白是有活性的，但是在原核表达中，很多蛋白是得不到上清的，如果上清中有很好，没有只能纯化包涵体，只是蛋白没有活性保证，有人可以接受有人不可有接受，但是上清又没有，那只能采取其他办法，比如用酵母表达或做瞬时转染表达在真核体内得到活性蛋白
赞一下 回复此楼
我就是我，是不一样的烟火
6楼2015-10-29 11:40:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小鼹鼠 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 P4JhWrbJGjSe 2026-08-14 5/250 2026-08-15 15:46 by QXtWNz7PI7wZ
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 14:41 by QXtWNz7PI7wZ
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +26 医学老男孩 2026-08-13 57/2850 2026-08-15 14:25 by JChen2024
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 3/150 2026-08-15 12:41 by KxMI1BYBxWX1
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 HFw0lei2R37i 2026-08-14 9/450 2026-08-15 11:33 by KxMI1BYBxWX1
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +6 Ldrop2023 2026-08-13 6/300 2026-08-15 10:09 by tuanggou
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 7lpolszZVXgi 2026-08-14 6/300 2026-08-15 09:28 by sunzitan
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭