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小鼹鼠

木虫 (小有名气)

[求助] 沉淀和上清是什么意思啊?

弱弱地问一句,每次做蛋白胶的时候,要跑沉淀和上清,请问沉淀和上清分别是什么?为什么要看是在沉淀还是上清里表达?
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天道酬勤
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yangqq8282

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上清是离心后上面清清的液体
4楼2012-10-22 20:36:13
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hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
细胞破碎后,离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体,上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说,表达的蛋白要有活性,都是以可溶性蛋白的形式存在,在沉淀中的包涵体,是错误折叠的蛋白,没有活性。
2楼2012-10-22 20:19:39
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小鼹鼠

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hippo_li at 2012-10-22 20:19:39
细胞破碎后,离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体,上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说,表达的蛋白要有活性,都是以可溶性蛋白的形式存在,在沉淀中的包涵体,是错误折叠的蛋白,没有活性。

谢谢!
天道酬勤
3楼2012-10-22 20:30:27
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jimmy7633

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.有些蛋白是分泌性的,所以你离心后,蛋白在上清里。
2.大部分蛋白是非分泌性的,你离心后,但还还是在细胞里,即沉淀中。
5楼2012-10-23 10:22:27
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