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生物样品前处理问题
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最近做药动，对于样品前处理的沉淀蛋白法不太理解。用与水项混溶的有机溶剂沉淀蛋白时，比如说用乙腈，我取500ul血浆，加入500ul乙腈，涡旋离心后要取上清进样，但是上清的总体积我不知道，取一定量上清进样的话，提取回收率该怎么算呢？上清液的总体积用不用知道呢？请高手指点迷津。 例：取肝素抗凝血浆600uL，置10mL具塞离心试管中，依次加入内标溶液50ul和乙腈3mL，涡旋混合，离心，分取上清，于40℃氮气流下吹干，残渣加入流动相80ul，涡旋，高速 离心(16000rpm/min)10min，取上清液20uL，注入高效液相色谱仪。 这个过程中“分取上清”是把上清液完全取出吗？并且要确定总的上清量吗？如果不是的话，那提取回收率该怎么算呢？ |
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