| 查看: 1769 | 回复: 5 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
[交流]
western样品处理问题 已有4人参与
|
||||
|
western样品处理，各位大虾们有木有什么好办法哦？ 跪求各方意见哦，呵呵、、、、 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
宠物寄生虫防治：氟雷拉纳阻断GABA受体，持效12周驱杀跳蚤蜱虫
已经有0人回复
-
为呼吸打开通道：依伐卡托的科学之旅
已经有1人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有267人回复
-
Dordaviprone（ONC201）：小分子药物在中线胶质瘤中的应用
已经有0人回复
-
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
-
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
-
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
-
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
-
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
-
MCC950：NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景
已经有0人回复
-
康替唑胺研发17年：如何解决多重耐药菌感染难题
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- western抗体问题
已经有7人回复
- 气相样品处理问题
已经有8人回复
- Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
已经有22人回复
- 【求助】关于SEM样品处理的问题
已经有6人回复
- 【求助】做质谱前样品预处理的问题
已经有17人回复
- 【求助/交流】western 曝光actin正常，但是样品却曝不出来
已经有37人回复
- 【求助/交流】western 曝光问题
已经有20人回复
- 【求助/交流】细胞裂解的问题
已经有19人回复
- western blot 求助
已经有4人回复
- 【求助】有关做核磁共振前，样品的前处理问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】求教电泳的基本问题
已经有5人回复
- western蛋白样品为什么要煮沸再冰浴
已经有9人回复
zhaoyonggang
银虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 193
- 散金: 5
- 红花: 2
- 帖子: 159
- 在线: 61.7小时
- 虫号: 1480330
- 注册: 2011-11-07
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
2楼2011-11-19 11:31:47
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！很活跃哦，继续加油哈~ 2011-11-23 20:26:22
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！很活跃哦，继续加油哈~ 2011-11-23 20:26:22
|
细胞样品还是组织样品？我的方法很普遍，但是要求操作条件比较严格~ 这样，收集细胞（或者把组织剪成碎片），离心后弃掉上清培养基，然后加入组织/细胞裂解液，一般都用RIPA或者cell lysis，但是一定记住要加足够量的蛋白酶抑制剂！！！有用PMSF的，但是我觉得Roche公司的“Protease Inhibitor Cocktail Tables”更好用~ 在冰上静置20-30min等细胞、组织裂解稍完全些，上超声振荡或者组织研磨仪，把细胞、组织打成粉碎均一的匀浆液；再高转速离心（14000rpm），3-5min，你会发现没有裂开的组织纤维或者细胞碎片都粘在管底了，上清就都是你的蛋白！ LZ注意啊，操作整个过程尽量都要在冰上进行！！！ |
3楼2011-11-23 15:48:38
4楼2011-11-24 16:56:00
5楼2011-11-25 20:15:35
6楼2011-11-30 15:51:25