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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 沉淀和上清是什么意思啊？
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小鼹鼠

木虫 (小有名气)

[求助] 沉淀和上清是什么意思啊？

弱弱地问一句，每次做蛋白胶的时候，要跑沉淀和上清，请问沉淀和上清分别是什么？为什么要看是在沉淀还是上清里表达？
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天道酬勤
1楼2012-10-22 19:49:51
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小鼹鼠

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hippo_li at 2012-10-22 20:19:39
细胞破碎后，离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体，上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说，表达的蛋白要有活性，都是以可溶性蛋白的形式存在，在沉淀中的包涵体，是错误折叠的蛋白，没有活性。

谢谢！
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天道酬勤
3楼2012-10-22 20:30:27
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hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞破碎后，离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体，上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说，表达的蛋白要有活性，都是以可溶性蛋白的形式存在，在沉淀中的包涵体，是错误折叠的蛋白，没有活性。
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2楼2012-10-22 20:19:39
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yangqq8282

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上清是离心后上面清清的液体
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4楼2012-10-22 20:36:13
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jimmy7633

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.有些蛋白是分泌性的，所以你离心后，蛋白在上清里。
2.大部分蛋白是非分泌性的，你离心后，但还还是在细胞里，即沉淀中。
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5楼2012-10-23 10:22:27
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