应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 沉淀和上清是什么意思啊？
61/1返回列表
查看: 5509  |  回复: 5
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小鼹鼠

木虫 (小有名气)

[求助] 沉淀和上清是什么意思啊？

弱弱地问一句，每次做蛋白胶的时候，要跑沉淀和上清，请问沉淀和上清分别是什么？为什么要看是在沉淀还是上清里表达？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
天道酬勤
1楼2012-10-22 19:49:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞破碎后，离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体，上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说，表达的蛋白要有活性，都是以可溶性蛋白的形式存在，在沉淀中的包涵体，是错误折叠的蛋白，没有活性。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-10-22 20:19:39
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小鼹鼠

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hippo_li at 2012-10-22 20:19:39
细胞破碎后，离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体，上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说，表达的蛋白要有活性，都是以可溶性蛋白的形式存在，在沉淀中的包涵体，是错误折叠的蛋白，没有活性。

谢谢！
回复此楼
天道酬勤
3楼2012-10-22 20:30:27
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangqq8282

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上清是离心后上面清清的液体
赞一下 回复此楼
4楼2012-10-22 20:36:13
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jimmy7633

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.有些蛋白是分泌性的，所以你离心后，蛋白在上清里。
2.大部分蛋白是非分泌性的，你离心后，但还还是在细胞里，即沉淀中。
赞一下 回复此楼
5楼2012-10-23 10:22:27
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古月问你哦

铜虫 (小有名气)
不是啊，，沉淀是沉淀，是包涵体，但是包涵体也是可溶性的，包涵体复性得到的蛋白活性没有保证，上清一定是可溶性的，在原核表达中上清的得到的蛋白是有活性的，但是在原核表达中，很多蛋白是得不到上清的，如果上清中有很好，没有只能纯化包涵体，只是蛋白没有活性保证，有人可以接受有人不可有接受，但是上清又没有，那只能采取其他办法，比如用酵母表达或做瞬时转染表达在真核体内得到活性蛋白
赞一下 回复此楼
我就是我，是不一样的烟火
6楼2015-10-29 11:40:50
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小鼹鼠 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭