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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 沉淀和上清是什么意思啊？
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小鼹鼠

木虫 (小有名气)

[求助] 沉淀和上清是什么意思啊？

弱弱地问一句，每次做蛋白胶的时候，要跑沉淀和上清，请问沉淀和上清分别是什么？为什么要看是在沉淀还是上清里表达？
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天道酬勤
1楼 2012-10-22 19:49:51
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古月问你哦

铜虫 (小有名气)
不是啊，，沉淀是沉淀，是包涵体，但是包涵体也是可溶性的，包涵体复性得到的蛋白活性没有保证，上清一定是可溶性的，在原核表达中上清的得到的蛋白是有活性的，但是在原核表达中，很多蛋白是得不到上清的，如果上清中有很好，没有只能纯化包涵体，只是蛋白没有活性保证，有人可以接受有人不可有接受，但是上清又没有，那只能采取其他办法，比如用酵母表达或做瞬时转染表达在真核体内得到活性蛋白
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我就是我，是不一样的烟火
6楼2015-10-29 11:40:50
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hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞破碎后，离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体，上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说，表达的蛋白要有活性，都是以可溶性蛋白的形式存在，在沉淀中的包涵体，是错误折叠的蛋白，没有活性。
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2楼2012-10-22 20:19:39
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小鼹鼠

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hippo_li at 2012-10-22 20:19:39
细胞破碎后，离心分离的沉淀和上清。沉淀主要是菌体碎片和包涵体，上清主要包含细胞中的可溶性蛋白。一般来说，表达的蛋白要有活性，都是以可溶性蛋白的形式存在，在沉淀中的包涵体，是错误折叠的蛋白，没有活性。

谢谢！
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天道酬勤
3楼2012-10-22 20:30:27
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yangqq8282

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上清是离心后上面清清的液体
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4楼2012-10-22 20:36:13
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