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zhangbaocau

新虫 (小有名气)

[求助] SDS-page问题

请问大家，我的SDS-page凝胶老是容易破，还有条带不清晰是怎么回事列？？
最左边的是MARKER
SDS-page问题
22-IMG_3976.jpg
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1楼 2013-05-25 13:32:39
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhangbaocau: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-05-26 17:06:41
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-07-15 11:26:19
胶容易破可能是操作问题，也可能是胶的配方的问题。至于条带清晰与否，我觉得是你的样品没有处理好，上样量也偏大。样品上样前最好离心。
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2楼2013-05-26 02:03:25
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志子

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhangbaocau: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-05-26 17:06:52
常用分离胶的浓度是10%，浓缩胶3%，电流20mA电压120v，蛋白样品是用乙醇沉淀法从溶液中沉淀出来，然后去上清，加上样缓冲液煮沸5min。在点样前先5000g离心1min，然后取上清液进行点样。
感觉你点样浓度过高了，，，，或者电压太高了。。。换成60V慢跑试试。这颜色蛋白应该没有降解
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3楼2013-05-26 02:16:08
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zhangbaocau

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 志子 at 2013-05-26 02:16:08
常用分离胶的浓度是10%，浓缩胶3%，电流20mA电压120v，蛋白样品是用乙醇沉淀法从溶液中沉淀出来，然后去上清，加上样缓冲液煮沸5min。在点样前先5000g离心1min，然后取上清液进行点样。
感觉你点样浓度过高了，，， ...

请问最左边的3条带太淡，是怎么回事？？
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4楼2013-05-26 16:11:15
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zhangbaocau

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-26 02:03:25
胶容易破可能是操作问题，也可能是胶的配方的问题。至于条带清晰与否，我觉得是你的样品没有处理好，上样量也偏大。样品上样前最好离心。

请问最左边的条带太淡是怎么回事l列？？
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5楼2013-05-26 16:12:17
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志子

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangbaocau at 2013-05-26 16:11:15
请问最左边的3条带太淡，是怎么回事？？...

如果都不清晰可能是有降解吧，但是你这个右边还好啊，是不是接触的问题？……恕不知啊，
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6楼2013-05-26 16:46:24
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by zhangbaocau at 2013-05-26 16:12:17
请问最左边的条带太淡是怎么回事l列？？...

可能是上样量不够或者样品本身就有问题。
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7楼2013-07-14 23:40:10
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