| 查看: 1780 | 回复: 5 | ||
yajune铁杆木虫 (职业作家)
|
[求助]
关于荧光定量PCR基因扩增的问题
|
| 我试验做的是药物处理以后，斑马鱼肝脏内几种基因表达量变化的试验。我选的基因里边有两个功能接近的基因，DHCR7和DHCR24，这两个是胆固醇生物合成中的脱氢胆固醇还原酶（7位和24位），两个基因的序列是从genebank上查的，然后都是用primer设计的引物。然后试验结果发现，这两个基因的结果有点过于接近，就是他们的表达量随药物处理浓度变化的趋势几乎完全一样，而其他基因则不会有这么接近趋势。再加上这两个基因的功能也一样，只是位点不同，所以我有点怀疑会不会我扩出来其实是一个基因，就是说我虽然是当两个基因设计的引物，但是由于两个基因序列很接近，其实扩增出来的是同一个基因。我以前没做过分子的试验，所以不太懂，我想问一下我说的这种情况是否有可能出现。可能性有多大？然后我怎么判断我扩增出来的这两个基因是两种还是一种？ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有184人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 荧光定量PCR扩增效率低
已经有16人回复
- 荧光定量PCR设计了三对引物了，都扩增不出来，郁闷啊
已经有4人回复
- 有做过荧光定量PCR的吗？
已经有9人回复
- 荧光定量PCR实验技术
已经有15人回复
- 相对定量荧光PCR结果分析中的SD如何计算？
已经有7人回复
- 荧光定量PCR的扩增曲线很奇怪，什么原因
已经有7人回复
- 救命啊！荧光定量PCR 扩增问题
已经有15人回复
- 荧光定量PCR扩增效率怎么做？？？？我要被逼疯了
已经有17人回复
- 相对定量PCR求助
已经有16人回复
- 荧光定量PCR与普通PCR产物不一样？
已经有6人回复
- 标准菌株建立荧光定量PCR的标准曲线
已经有5人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？
已经有8人回复
- 【求助/交流】荧光定量pcr出现直线扩增曲线，求指导
已经有5人回复
- 【分享】荧光定量PCR简介
已经有13人回复
- 【求助/交流】关于做荧光定量pcr的模板问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】关于荧光定量PCR中cdna合成的问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】荧光定量pcr
已经有11人回复
2楼2013-05-19 23:00:32
yajune
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 7077.4
- 散金: 19076
- 红花: 11
- 帖子: 3766
- 在线: 177.8小时
- 虫号: 873714
- 注册: 2009-10-16
- 性别: GG
- 专业: 化学环境污染与健康
|
谢谢，我用在primer-blast里边把我引物的序列输进去了，然后把生物改成了斑马鱼，别的什么都没调，直接点了get primer，这个操作正确么？下边是DHCR24出来的结果，这个结果能说明引物有特异性么 Sequence (5'->3') Length Tm GC% Self complementarity Self 3' complementarity Forward primer TCAGGTGACTGCTCTGCTCAACTCT 25 65.45 52.00 4.00 0.00 Reverse primer ACCAGACTGCCGTCAGCCAACA 22 66.63 59.09 6.00 1.00 Products on target templates >NM_001008645.1 Danio rerio 24-dehydrocholesterol reductase (dhcr24), mRNA product length = 180 Forward primer 1 TCAGGTGACTGCTCTGCTCAACTCT 25 Template 539 ......................... 563 Reverse primer 1 ACCAGACTGCCGTCAGCCAACA 22 Template 718 ...................... 697 |
3楼2013-05-20 07:49:11
4楼2013-05-20 19:33:53
yajune
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 7077.4
- 散金: 19076
- 红花: 11
- 帖子: 3766
- 在线: 177.8小时
- 虫号: 873714
- 注册: 2009-10-16
- 性别: GG
- 专业: 化学环境污染与健康
5楼2013-05-22 12:18:40
foreverlukel
新虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 65.5
- 红花: 2
- 帖子: 30
- 在线: 9.3小时
- 虫号: 2403299
- 注册: 2013-04-06
- 专业: 免疫生物学
6楼2013-05-23 13:45:09
