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20083630zhan

木虫 (正式写手)


[交流] 连接转化交流贴

大家把自己连接转化遇到的困难以及经验写下来吧,
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yiloutingyu

铜虫 (小有名气)


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20083630zhan(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-16 08:24:08
已经做了一个月了,还是没做出来,一直涂板长不出来,后来找到原因,是大肠杆菌的原因,换了 做场感受态之后,能长出来,挑单菌落后摇不起来。就这样耗着,前面都没问题,我也各种验证,现在在怀疑我的感受态试剂盒。连接以前是在16度 水浴过夜,现在换成4度冰箱里冰浴过夜,效果好一些。在转化的过程中,最好是42度 热击90秒。
4楼2013-05-15 23:22:07
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sunnyboylg

木虫 (正式写手)


★ ★
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20083630zhan(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-16 08:24:00
这几天做质粒转化,一直没长出菌来,我想想估计是质粒酶切跑电泳切胶回收浓度太低了,都没有多少质粒转进去,而且感受态细胞浓度也不够高。总之都是浓度低惹的祸
2楼2013-05-15 22:17:56
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光树林

木虫 (著名写手)


★ ★
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20083630zhan(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-05-19 18:16:31
回收浓度确实有一定的影响,主要是最好16度多连接一会儿,过夜挺好的
5楼2013-05-16 00:00:05
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
20083630zhan(myprayer代发): 金币+1, 感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-16 08:24:17
有时候感受态细胞不是特别理想。自己制备的感受态用氨苄的抗性板有时候负对照会长克隆。
6楼2013-05-16 06:45:36
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