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小郭tongxue

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[求助] 求高手帮助：EcoR I 和Nde I双酶切pET28a（+）的纯化问题

EcoR I 和Nde I双酶切pET28a（+）后的片段可以不做切胶回收，直接做纯化么？切后的片段有一个很小的片段，直接纯化会有影响么？

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小郭tongxue

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1楼 2013-05-07 11:24:14

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tiehua406

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【答案】应助回帖

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直接纯化试剂盒纯化。。。一点问题都没有。。。一般切下来的片段不大于200bp都没有什么问题的。

10楼2013-05-10 00:00:40

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wsglpglp

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【答案】应助回帖

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小郭tongxue(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-08 02:05:36

我做过hae 3酶切基因组dna就是直接酚氯仿抽提的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

逼自己一次，才知道自己有多优秀.

2楼2013-05-07 19:38:53

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mitocam

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【答案】应助回帖

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小郭tongxue(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-08 02:05:49

跑胶回收后做ligation最好，否则以后背景杂，筛选克隆够你呛的。

3楼2013-05-07 19:54:10

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小郭tongxue

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引用回帖:

3楼: Originally posted by mitocam at 2013-05-07 19:54:10
跑胶回收后做ligation最好，否则以后背景杂，筛选克隆够你呛的。

切完的片段有一个片段只有19bp，会有很大的影响么？

4楼2013-05-07 21:48:33

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