应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何解释这个PCR结果？
301/3返回列表123下一页
查看: 2277  |  回复: 29
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

朝着江河走

金虫 (小有名气)

[交流] 如何解释这个PCR结果？ 已有17人参与

连续两次了，PCR结果都是这样，DNA提取没问题。不知道是什么原因，与引物有关吗？

VI78`7ATV5(RRA]WEYK8[V3.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
生命在于运动
1楼 2013-04-27 09:40:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

rongduoyan

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-01 18:56:05
gyesang: 回帖置顶 2013-05-01 18:56:07
查找原因关键是多做对照，楼主可以用别人做出来的引物，最好是内参基因按照别人做出来的条件用自己提的DNA做模版，先P一个看，如果有说明不是你DNA提取的问题，是引物的问题，如果没有，可能要考虑你模版以及PCR体系的问题，如果是所有的东西用的别人的，只有模版是自己的，那很好确认是模版的问题还是PCR的问题了，楼主多做对照吧！
赞一下(1人) 回复此楼
23楼2013-05-01 12:45:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

dafeizizhu

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2013-05-01 18:54:34
要找出具体原因，我建议先从引物入手。我个人经验，引物是绝对关键的问题，拿到引物之后，先找到合适的退火温度，再进行实验。一般是先做个梯度PCR，找到合适的退火温度；再寻找合适的循环数等问题，，，，，，
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2013-04-28 10:49:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kkzzll0624

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-01 18:54:48
基因组Dna跑个胶，引物核实一下，用实验室比较成熟的反应试剂，反应体系做一次，退火温度用软件预测一下，实际实验时退火温度再稍微低点。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
好好学习，天天向上！
12楼2013-04-28 11:03:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fancyxie

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
做个梯度PCR先检验一下引物再说
赞一下(1人) 回复此楼
飞翔靠翅膀更靠梦想！
22楼2013-05-01 10:42:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

sl35537417

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励发贴交流，为楼主问题解决提供可能的线索！ 2013-04-27 13:49:36
什么样本？基因组DNA还是cDNA？ 做温度梯度了没？
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-27 09:51:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朝着江河走

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sl35537417 at 2013-04-27 09:51:39
什么样本？基因组DNA还是cDNA？ 做温度梯度了没？

基因组DNA，没做过温度梯度，怎么做啊？谢谢
赞一下 回复此楼
生命在于运动
3楼2013-04-27 10:15:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sl35537417

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
什么物种的基因组？真核的原核的？找个能做温度梯度的PCR仪  退火温度按照不同温度进行PCR
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-27 10:34:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朝着江河走

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sl35537417 at 2013-04-27 10:34:08
什么物种的基因组？真核的原核的？找个能做温度梯度的PCR仪  退火温度按照不同温度进行PCR

放线菌，没做过温度PCR，一般的PCR仪可以做吗？
赞一下 回复此楼
生命在于运动
5楼2013-04-27 10:58:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sl35537417

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 朝着江河走 at 2013-04-27 10:58:46
放线菌，没做过温度PCR，一般的PCR仪可以做吗？...

不确定   如果在45-65 之间的退火温度都P不出来的话 就换引物啊
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-27 11:31:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-04-27 15:09:27
模板定浓度了吗？用同样的模板是否可以P出其他基因？LZ连引物二聚体也没有，怀疑PCR体系是否正确。此外，目的片段应该多大，PCR程序没有问题吗？这些都没问题后，优化引物的退火温度。
赞一下 回复此楼
7楼2013-04-27 14:47:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jw1985629

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
程序问题，引物问题。你排除下吧
赞一下 回复此楼
i still have so much to do
8楼2013-04-27 21:01:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

raftsman

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
模板是什么
盐粒子浓度会不会太高
赞一下 回复此楼
9楼2013-04-28 00:04:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dafeizizhu

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 朝着江河走 at 2013-04-27 10:58:46
放线菌，没做过温度PCR，一般的PCR仪可以做吗？...

过程pcr仪一般都能做梯度PCR实验。
赞一下 回复此楼
10楼2013-04-28 10:47:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 朝着江河走 的主题更新
301/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 u1xkze8ybe 2026-07-30 7/350 2026-07-31 12:10 by syhhffkrym
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 u1xkze8ybe 2026-07-30 3/150 2026-07-31 12:08 by syhhffkrym
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 u1xkze8ybe 2026-07-30 6/300 2026-07-31 12:05 by syhhffkrym
[教师之家] 基础研究怎么拉横向，学校到款任务越来越多，难以完成 拉横向，都有哪些途径啊 +6 锦衣卫寒战 2026-07-28 6/300 2026-07-31 11:27 by syl200707
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 小木虫看见有人已经知道结果了 +15 1234567wang 2026-07-25 19/950 2026-07-31 08:30 by ZJTJZ
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +8 布布和一二 2026-07-30 8/400 2026-07-31 01:51 by alongwaytogo
[基金申请] 系统今天又提示维护了，估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +14 wangze12014 2026-07-28 17/850 2026-07-30 20:10 by kissu88
[考博] 申请2027年材料/化学类博士 10+3 考研老狗? 2026-07-25 5/250 2026-07-30 19:33 by 白色木鱼
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
[基金申请] 今年的WR进展到哪一步了？ +5 wsgjhwz 2026-07-25 9/450 2026-07-30 12:59 by 可淡不可忘
[有机交流] 产物和副产物价值比较 30+4 小汤02 2026-07-27 5/250 2026-07-30 12:44 by czyzsu
[基金申请] 时间戳他又来了 +14 晓晓爱翠翠 2026-07-26 17/850 2026-07-29 16:30 by 呵呵二哥
[有机交流] 这个自发加氧反应的机理是什么？ 50+4 YUAN2273 2026-07-25 7/350 2026-07-29 12:27 by xiaobenpu
[基金申请] 没消息就是被刷了呗 +13 lambert2014 2026-07-24 14/700 2026-07-29 10:38 by msh145800
[基金申请] 这种情况还有戏吗 +5 drbart 2026-07-27 11/550 2026-07-29 05:50 by drbart
[基金申请] 同事接到电话了，我却没有 +4 1234567wang 2026-07-27 4/200 2026-07-28 10:11 by GOODLUCKER
[基金申请] 准备明年的基金了 +5 Tide man 2026-07-27 5/250 2026-07-28 09:25 by newfuzzy1
[分析] 水蒸气蒸馏法乳化现象 +3 月光娇娇 2026-07-26 3/150 2026-07-26 23:25 by caiyun
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭