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gissingtan

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 148
帖子: 15
在线: 19.9小时
虫号: 2341070
注册: 2013-03-12
专业: 植物生理与生化

[求助] 有关菌落PCR,求解析~

前一段做的转化长出的转化子，在抗性板上划线，用枪头沾取（划线上长满了菌，没有单菌落）在PCR体系中混一下，进行PCR反映。总共10个样品，只有第十个出现了目的条带。其他样品在点样孔以及点样口附近有明亮的带，师兄师姐帮帮忙，这是怎么回事？

PCR.jpg

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1楼 2013-04-25 17:06:08

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andywang6137

木虫 (著名写手)

应助: 3 (幼儿园)
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虫号: 607807
注册: 2008-09-20
专业: 食品加工技术

★
gyesang: 金币+1, 我的是加酶后95度，510分钟，再进行后面的循环！ 2013-04-28 13:51:03

引用回帖:

9楼: Originally posted by yy001519 at 2013-04-27 11:39:15
模版量太大，建议你将平板上的菌落跳出，重新活菌，然后再做菌落PCR，即取1ul菌液，其他按标准体系加好，注不能加酶，然后98度煮10min，迅速取出冰上降温，然后加酶，进行PCR扩增！

菌液PCR吗?我们一般都是加酶后95度，10分钟，再进行后面的循环。

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10楼2013-04-28 09:26:50

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