24小时热门版块排行榜    

查看: 3530  |  回复: 11

chyqiu

木虫 (著名写手)

[求助] 蛋白放置一段时间后出现沉淀的问题

脂多糖与蛋白结合后,经纯化后放在2-8℃几天后出沉淀的原因。请高手指点迷津。谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wushm388

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分析 2013-04-24 07:07:29
(1)你的蛋白溶液是无菌的吗?若未除菌的话是回染菌导致沉淀。
(2)蛋白在4度长期放置会聚集(aggregation)或被氧化导致沉淀,可尝试加入蛋白稳定剂和抗氧化剂。
(3)改变蛋白贮藏条件。
4楼2013-04-23 14:12:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

chyqiu

木虫 (著名写手)

2楼2013-04-23 10:29:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

256k

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-04-24 07:06:54
lz自己顶贴????  应该是不稳定变性了,分离出来跑跑胶看看就确切了。
3楼2013-04-23 12:23:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chyqiu

木虫 (著名写手)

我的蛋白单独放置不会出现沉淀,是与多糖共价结合以后,经凝胶柱纯化,除菌过滤后保存于4℃,但放置几天后就慢慢的出现沉淀了。请问加什么稳定剂比较好,试过加1%的甘油,但还是出现沉淀?
5楼2013-04-23 15:53:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

会思想的芦苇

金虫 (正式写手)

自己顶帖子  哈哈哈哈哈哈哈哈哈
6楼2013-04-25 10:31:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

帐篷灯

铁虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与,不过回帖更倾向于交流,而不是应助 2013-04-27 08:22:26
引用回帖:
5楼: Originally posted by chyqiu at 2013-04-23 15:53:39
我的蛋白单独放置不会出现沉淀,是与多糖共价结合以后,经凝胶柱纯化,除菌过滤后保存于4℃,但放置几天后就慢慢的出现沉淀了。请问加什么稳定剂比较好,试过加1%的甘油,但还是出现沉淀?

你的buffer提醒能告知一下?还有蛋白的等电点,大小等
7楼2013-04-26 10:00:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chyqiu

木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 帐篷灯 at 2013-04-26 10:00:29
你的buffer提醒能告知一下?还有蛋白的等电点,大小等...

没用缓冲,蛋白等电点5.2左右,但单独的蛋白是稳定的,现在是我的蛋白与多糖结合后,不稳定。
8楼2013-04-28 14:18:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mssj300130

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

估计交联的太厉害了吧,如果结合工艺不改的话,成品加点盐,调调pH吧,或者直接冻起来保存,一次冻融的话问题不大
9楼2013-05-10 01:04:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanjun0106

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
chyqiu: 金币+2, ★★★很有帮助, 很高兴,遇到同行! 2013-05-10 18:38:46
1.你的样品纯化收集后的浓度是多少?如果太高可以尝试收集后立即加生理盐水稀释;
2.层析纯化时洗脱液是什么?一般应为0.2N NaCl;
3.多糖衍生率和结合物的多糖蛋白比为多少?如果1、2均做到还是不行,要考虑调整工艺参数,我想你的结合物应该是要作为疫苗候选物,溶解性的问题不解决,安全性和免疫原性的研究也没法继续。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

10楼2013-05-10 11:53:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chyqiu 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +10 基诺咪客 2026-08-17 14/700 2026-08-19 10:34 by 基诺咪客
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +7 kkkl_v 2026-08-19 7/350 2026-08-19 10:28 by pfeng
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +4 ziyangfang 2026-08-19 4/200 2026-08-19 10:23 by JChen2024
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +52 医学老男孩 2026-08-13 114/5700 2026-08-19 09:38 by 医学老男孩
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +4 Tide man 2026-08-12 5/250 2026-08-19 07:41 by 201120518022
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 9/450 2026-08-18 20:09 by 奶牛小黑
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
信息提示
请填处理意见