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chyqiu

木虫 (著名写手)

[求助] 蛋白放置一段时间后出现沉淀的问题

脂多糖与蛋白结合后,经纯化后放在2-8℃几天后出沉淀的原因。请高手指点迷津。谢谢!
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帐篷灯

铁虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与,不过回帖更倾向于交流,而不是应助 2013-04-27 08:22:26
引用回帖:
5楼: Originally posted by chyqiu at 2013-04-23 15:53:39
我的蛋白单独放置不会出现沉淀,是与多糖共价结合以后,经凝胶柱纯化,除菌过滤后保存于4℃,但放置几天后就慢慢的出现沉淀了。请问加什么稳定剂比较好,试过加1%的甘油,但还是出现沉淀?

你的buffer提醒能告知一下?还有蛋白的等电点,大小等
7楼2013-04-26 10:00:29
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256k

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-04-24 07:06:54
lz自己顶贴????  应该是不稳定变性了,分离出来跑跑胶看看就确切了。
3楼2013-04-23 12:23:50
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wushm388

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分析 2013-04-24 07:07:29
(1)你的蛋白溶液是无菌的吗?若未除菌的话是回染菌导致沉淀。
(2)蛋白在4度长期放置会聚集(aggregation)或被氧化导致沉淀,可尝试加入蛋白稳定剂和抗氧化剂。
(3)改变蛋白贮藏条件。
4楼2013-04-23 14:12:42
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chyqiu

木虫 (著名写手)

我的蛋白单独放置不会出现沉淀,是与多糖共价结合以后,经凝胶柱纯化,除菌过滤后保存于4℃,但放置几天后就慢慢的出现沉淀了。请问加什么稳定剂比较好,试过加1%的甘油,但还是出现沉淀?
5楼2013-04-23 15:53:39
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