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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白放置一段时间后出现沉淀的问题
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chyqiu

木虫 (著名写手)

[求助] 蛋白放置一段时间后出现沉淀的问题

脂多糖与蛋白结合后，经纯化后放在2-8℃几天后出沉淀的原因。请高手指点迷津。谢谢！
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1楼 2013-04-23 10:28:35
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chyqiu

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 帐篷灯 at 2013-04-26 10:00:29
你的buffer提醒能告知一下？还有蛋白的等电点，大小等...

没用缓冲，蛋白等电点5.2左右，但单独的蛋白是稳定的，现在是我的蛋白与多糖结合后，不稳定。
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8楼2013-04-28 14:18:15
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256k

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-04-24 07:06:54
lz自己顶贴？？？？  应该是不稳定变性了，分离出来跑跑胶看看就确切了。
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3楼2013-04-23 12:23:50
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wushm388

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分析 2013-04-24 07:07:29
（1）你的蛋白溶液是无菌的吗？若未除菌的话是回染菌导致沉淀。
（2）蛋白在4度长期放置会聚集（aggregation）或被氧化导致沉淀，可尝试加入蛋白稳定剂和抗氧化剂。
（3）改变蛋白贮藏条件。
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4楼2013-04-23 14:12:42
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chyqiu

木虫 (著名写手)
我的蛋白单独放置不会出现沉淀，是与多糖共价结合以后，经凝胶柱纯化，除菌过滤后保存于4℃，但放置几天后就慢慢的出现沉淀了。请问加什么稳定剂比较好，试过加1%的甘油，但还是出现沉淀？
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5楼2013-04-23 15:53:39
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