24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 5111  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sinky熹

铜虫 (初入文坛)

[求助] 双向测序序列拼接不起来

偷懒直接用的PCR产物测序,测序结果告诉我双向测序成功,但是序列拼接不起来,而且看峰图,应该是非特异性带,产物大小居然接近我的目的产物,很费解,因为电泳图中虽然有些二聚体,但也是很小的,几十bp最多了。。求讲解,,
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

测序相关问题

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
sinky熹: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-04-03 09:52:55
引用回帖:
4楼: Originally posted by sinky熹 at 2013-04-03 09:24:53
是的,我用cap3拼不成一个分子。因为相同产物其他测出来了,跟我的目的带很近,所以我推测应该是在这个上下。
我是做浓度梯度的时候跑出了个很奇怪的图,浓度高,片段偏小,所以拿去测个序。。...

问题可能出在最初PCR上。试试重新制备模板稀释引物再P一下看看。
6楼2013-04-03 09:36:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sinky熹: 金币+4 2013-04-03 09:53:18
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-31 23:09:23
拼接不起来是指两个引物测出的序列不能拼成一个分子?那你如何知道产物大小的?我觉得可能是PCR的时候P出的可能是分子量与目的条带接近的其他分子,有可能是PCR体系污染了。
2楼2013-04-02 22:54:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sinky熹: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-04-03 09:53:07
把你测序获得序列放在NCBI里面blast看看是什么序列。
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-04-03 01:06:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sinky熹

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-02 22:54:10
拼接不起来是指两个引物测出的序列不能拼成一个分子?那你如何知道产物大小的?我觉得可能是PCR的时候P出的可能是分子量与目的条带接近的其他分子,有可能是PCR体系污染了。

是的,我用cap3拼不成一个分子。因为相同产物其他测出来了,跟我的目的带很近,所以我推测应该是在这个上下。
我是做浓度梯度的时候跑出了个很奇怪的图,浓度高,片段偏小,所以拿去测个序。。
4楼2013-04-03 09:24:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 339求调剂 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +6 麻辣鱿鱼 2026-03-27 7/350 2026-03-28 10:37 by Evan_Liu
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +9 丹青奶盖 2026-03-26 10/500 2026-03-28 07:45 by barnett0632
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +4 niko- 2026-03-27 4/200 2026-03-28 07:26 by fungyao
[考研] 320分,材料与化工专业,求调剂 +7 一定上岸aaa 2026-03-27 9/450 2026-03-28 07:07 by wangy0907
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 307求调剂 +8 超级伊昂大王 2026-03-24 9/450 2026-03-27 15:34 by 超级伊昂大王
[考研] 一志愿吉大071010,316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂 +3 jl0720 2026-03-26 3/150 2026-03-26 13:39 by zzll406
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 26考研-291分-厦门大学(085601)-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 各位老师您好:本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
信息提示
请填处理意见