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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量溶解曲线怎么回事？
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cnb1987

银虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量溶解曲线怎么回事？

刚跑了荧光定量，有一个基因的溶解曲线的峰在75度，而且峰也不够尖锐，跑胶之后是目的条带。不知道这是什么情况？用的百泰克的荧光定量试剂盒。

溶解曲线图.jpg



跑胶.jpg
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1楼 2013-03-31 09:32:33
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stt19890101

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-03-31 19:30:04
你说的溶解曲线是怎回事？溶解曲线是你的cDNA经过扩增之后，达到一定的量后，溶解的温度，溶解温度与你的目的片段长度和GC含量有关
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3楼2013-03-31 09:46:24
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cnb1987

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by stt19890101 at 2013-03-31 09:46:24
你说的溶解曲线是怎回事？溶解曲线是你的cDNA经过扩增之后，达到一定的量后，溶解的温度，溶解温度与你的目的片段长度和GC含量有关

这个溶解曲线和标准的不一样啊，我现在不确定是引物二聚体还是目的条带。能否从溶解曲线的图，看出我是不是目的条带？目的条带121bp
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4楼2013-03-31 09:49:32
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cnb1987

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by stt19890101 at 2013-03-31 09:46:24
你说的溶解曲线是怎回事？溶解曲线是你的cDNA经过扩增之后，达到一定的量后，溶解的温度，溶解温度与你的目的片段长度和GC含量有关

溶解曲线的峰值一般在80度以上啊
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5楼2013-03-31 09:50:07
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stt19890101

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
cnb1987(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-04-27 20:33:11
gyesang: 回帖置顶 2013-04-27 20:33:21
是不是二聚体在溶解曲线上是可以看出来的  你做实时定量的时候应该有NTC吧 一般你看看你的主峰前面是不是有小的峰就知道了  另外 不是所有的峰溶解温度都是80度以上的  这跟上面我跟你说的因素有关
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6楼2013-03-31 09:58:16
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