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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SYBR Green 荧光定量溶解曲线前端起点很高
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lijiao

铜虫 (初入文坛)

[求助] SYBR Green 荧光定量溶解曲线前端起点很高

求高手指教SYBR Green 荧光定量溶解曲线前端起点很高的原因。所用的机器为AB的stepone plus。具体的溶解曲线和相应的扩增曲线，multicomponent如下

溶解曲线



扩增曲线



multicomponent plot
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1楼2012-03-27 23:05:23
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xiaoyugutou

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得应该是引物在较低温度时有非特异性结合
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2楼2012-03-27 23:29:16
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, Good！ 2012-03-28 11:06:39
lijiao: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-03-28 16:17:00
嗯.....
能否再把融解曲线的温度再做低一点呢?
感觉左翼是有向下的趋势的，并不是说起点高，而是感觉本身这又是一个峰
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Let God do with it as He wills
3楼2012-03-27 23:59:36
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nh10705

新虫 (初入文坛)
会不会是引物二聚体？
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宁&海
4楼2012-03-28 09:56:41
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healy13

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
5楼2012-03-28 12:15:23
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lijiao

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-27 23:59:36:
嗯.....
能否再把融解曲线的温度再做低一点呢?
感觉左翼是有向下的趋势的，并不是说起点高，而是感觉本身这又是一个峰

谢谢指教，是可以做低一点的，我今天再试一次
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2012-03-28 15:53:23
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lijiao

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by nh10705 at 2012-03-28 09:56:41:
会不会是引物二聚体？

我也觉得是又引物二聚体
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7楼2012-03-28 15:53:49
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huang200669

新虫 (初入文坛)
我觉得这应该是非特异产物，可能是引物二聚体，也可能是引物和其它片段扩增的结果
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8楼2012-03-28 16:09:24
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