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hua_geduo

木虫 (正式写手)

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[交流] 转化感受态后提取质粒，测浓度总是很低

年前做表达，目的片段连接到T载体上，然后转化，挑菌，摇菌，提取质粒，测质粒浓度总是很低；现在我的表达载体量不够了，想转化后提取，使量大一点，但是发现提取后测浓度又遇到同样的状况，请问这是怎么回事啊？用的感受态是DH5α，提质粒的试剂盒是爱思进的，实验卡在这里了，急求帮助！

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1楼 2013-03-19 09:48:17

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hua_geduo

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引用回帖:

9楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-19 13:16:45
表达载体一般不如克隆载体的拷贝数高，提质粒一般浓度会小一些。你可以多摇些菌。裂解时的溶液按菌量增加，上column吸附的时候可以用同一个柱子，按常规方法elute就可以了。...

原来摇了4ml的菌液提的质粒，效果还是不理想，我再试试吧，谢谢