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转化相关问题-无法转化成功 已有8人参与
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| 最近做转化,一直转化不成功!酶切用的是BamHI 和EcoRI ,质粒是PET-28a,宿主是大肠,做了好几批转化了,转化的平板就是没有菌。我将感受态涂布,平板上不长菌,转化空载,平板上会有很多菌,说明感受态没问题吧。我进行双酶切验证,酶也没问题,我对目的基因进行双酶切并纯化后,进行跑胶,有条带,说明是有目的基因的。接下来只有连接酶了,接连两次用的都是新酶,转化的平板上就是没有菌落,这是为什么?我的思路错哪了?实验一直没有进展,急! |
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还以为是什么酶呢!傻掉了。。。