| 查看: 1270 | 回复: 2 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
hubei989木虫 (正式写手)
酵父菌
|
[求助]
引物特异性验证
|
||
|
最近准备做荧光定量PCR。已经设计了引物，想请问下怎么验证引物的特异性哇？ 用该引物进行PCR，然后对其产物进行测序比对可不可以呢？ 万分感谢哇~ |
回复此楼» 猜你喜欢
321求调剂
已经有5人回复
-
324求调剂
已经有6人回复
-
359求调剂
已经有7人回复
-
一志愿华北电力大学（北京），材料科学与工程学硕265，求调剂
已经有11人回复
-
368求调剂
已经有7人回复
-
288求调剂，一志愿华南理工大学071005
已经有3人回复
-
求生物学调剂
已经有13人回复
-
284求调剂
已经有3人回复
-
调剂
已经有8人回复
-
一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 设计了3条引物，请大家帮我看看是否可用，两个哪个好一些呢？谢谢了！
已经有12人回复
- 转化后菌液PCR鉴定，没有目的条带
已经有15人回复
- 特异性Promoter引物该怎么设计啊
已经有6人回复
- 氯霉素抗性的质粒转入氯霉素抗性的宿主菌，请问如何鉴定是否成功转入！？
已经有9人回复
- 5 RACE inner-PCR电泳结果无条带，是怎么回事？
已经有4人回复
- PBI121载体转化拟南芥，Tail-PCR扩增整合位点侧翼序列，为何只扩增得到载体部分序列？
已经有16人回复
- 质粒转化到大肠杆菌野生菌中验证遇到的非常非常怪的问题
已经有3人回复
- 克隆过程出现的问题
已经有7人回复
- TA克隆遇到的问题
已经有10人回复
- 连接转化后菌落PCR验证出现非特异性扩增
已经有5人回复
- 做一个克隆所需的最短时间？比比谁更高效快速！
已经有39人回复
- 求助全基因合成
已经有17人回复
- 【求助/交流】引物特异性PCR（SSP-PCR）检测SNP，是不是容易出现杂带呀
已经有11人回复
- 【求助/交流】论文中的引物可否信任？ blast发现特异性不好为什么？谢谢大家
已经有14人回复
- 【求助/交流】Real time PCR 熔点曲线求助，谢谢
已经有12人回复
- 【专题】引入酶切位点的引物设计问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】一个基因大概有2500bp左右。很长很长时间了，还没搞定，郁闷！请各位大�
已经有5人回复
- 【求助/交流】RNA的提取问题和qRT-PCR分析基因在不同时间的定量表达
已经有10人回复
- 【求助/交流】设计的引物的特异性问题
已经有3人回复
- 关于单引物验证..
已经有5人回复
soarrow
铁杆木虫 (正式写手)
酱油歪楼党
- 应助: 36 (小学生)
- 金币: 9904.6
- 红花: 20
- 帖子: 607
- 在线: 563小时
- 虫号: 1836931
- 注册: 2012-05-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒、病毒感染与宿主免疫
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-03-14 15:21:36
hubei989: 金币+5, ★★★很有帮助, 现在正在做的就是你说的第一条，在做克隆测序。还有个问题，如果我只做理论验证不做实验验证，会不会不严谨啊？（样比较多，许多都是未知菌，不好选取同源性相近的菌）） 2013-03-14 15:23:42
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-03-14 15:21:36
hubei989: 金币+5, ★★★很有帮助, 现在正在做的就是你说的第一条，在做克隆测序。还有个问题，如果我只做理论验证不做实验验证，会不会不严谨啊？（样比较多，许多都是未知菌，不好选取同源性相近的菌）） 2013-03-14 15:23:42
|
1. 可以在NCBI上面进行Blast，看看有没有目的基因以外的高同源性序列，这是理论验证； 2. 实验验证就是拿引物去做特异性验证---拿检测目标的核酸以及与目标同源性相近的其它核酸进行实验验证。 补充楼上的，如果对产物进行测序验证---Realtime PCR产物一般都比较小，100bp左右，PCR产物基本没法直接送公司回收测序，这个得做克隆测序。 |
3楼2013-03-14 12:52:36
eagles123
金虫 (正式写手)
- MicEPI: 1
- 应助: 154 (高中生)
- 金币: 5854.4
- 散金: 1607
- 红花: 12
- 帖子: 667
- 在线: 700.7小时
- 虫号: 322286
- 注册: 2007-03-11
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
2楼2013-03-13 18:55:08
