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hubei989木虫 (正式写手)
酵父菌
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[求助]
引物特异性验证
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最近准备做荧光定量PCR。已经设计了引物，想请问下怎么验证引物的特异性哇？ 用该引物进行PCR，然后对其产物进行测序比对可不可以呢？ 万分感谢哇~ |
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【答案】应助回帖
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1. 可以在NCBI上面进行Blast，看看有没有目的基因以外的高同源性序列，这是理论验证； 2. 实验验证就是拿引物去做特异性验证---拿检测目标的核酸以及与目标同源性相近的其它核酸进行实验验证。 补充楼上的，如果对产物进行测序验证---Realtime PCR产物一般都比较小，100bp左右，PCR产物基本没法直接送公司回收测序，这个得做克隆测序。 |
3楼2013-03-14 12:52:36
