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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量如何安排样品

小弟最近在做荧光定量PCR,5个不同处理,12个取样时间,2个器官,还要做内参及重复,如何安排实验才能减小,每板之间对结果的误差?
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2013-03-13 16:39:01
machao8405: 金币+2 2013-03-13 18:04:41
提好的RNA最好同时测浓度后反转录,反转录时要做master mix,这样避免不同时间反转的cDNA造成误差。此外,如果是做相对定量的话,同一样品的目的基因和内参一定要同时跑。如果做绝对定量,板与板之间要做内标。
3楼2013-03-12 23:54:06
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hy_sandra

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
machao8405: 金币+2 2013-03-13 18:04:36
?m?????????r?g???????RNA?r????????r??????r?y?????@??????????????????`?䶮??????????????????????]?P?S?????c?????И????????r??Ξ????
科研是無止盡的
2楼2013-03-12 23:13:09
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machao8405

木虫 (正式写手)

???????:
2?: Originally posted by hy_sandra at 2013-03-12 23:13:09
?m?????????r?g???????RNA?r????????r??????r?y?????@??????????????????`?䶮??????????????????????]?P?S?????c?????И????????r??Ξ????

??θ??????????????????????ε?????????
4楼2013-03-13 08:22:19
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machao8405

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-12 23:54:06
提好的RNA最好同时测浓度后反转录,反转录时要做master mix,这样避免不同时间反转的cDNA造成误差。此外,如果是做相对定量的话,同一样品的目的基因和内参一定要同时跑。如果做绝对定量,板与板之间要做内标。

不同时间点的样品,不在同一板跑影响大不大呢?
5楼2013-03-13 08:23:16
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