应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量如何安排样品
71/1返回列表
查看: 1248  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量如何安排样品

小弟最近在做荧光定量PCR，5个不同处理，12个取样时间，2个器官，还要做内参及重复，如何安排实验才能减小，每板之间对结果的误差？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-12 22:05:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hy_sandra

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
machao8405: 金币+2 2013-03-13 18:04:36
?m?????????r?g???????RNA?r????????r??????r?y?????@??????????????????`?䶮??????????????????????]?P?S?????c?????И????????r??Ξ????
赞一下 回复此楼
科研是無止盡的
2楼2013-03-12 23:13:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2013-03-13 16:39:01
machao8405: 金币+2 2013-03-13 18:04:41
提好的RNA最好同时测浓度后反转录，反转录时要做master mix，这样避免不同时间反转的cDNA造成误差。此外，如果是做相对定量的话，同一样品的目的基因和内参一定要同时跑。如果做绝对定量，板与板之间要做内标。
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-12 23:54:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

machao8405

木虫 (正式写手)
???????:
2?: Originally posted by hy_sandra at 2013-03-12 23:13:09
?m?????????r?g???????RNA?r????????r??????r?y?????@??????????????????`?䶮??????????????????????]?P?S?????c?????И????????r??Ξ????

??θ??????????????????????ε?????????
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-13 08:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

machao8405

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-12 23:54:06
提好的RNA最好同时测浓度后反转录，反转录时要做master mix，这样避免不同时间反转的cDNA造成误差。此外，如果是做相对定量的话，同一样品的目的基因和内参一定要同时跑。如果做绝对定量，板与板之间要做内标。

不同时间点的样品，不在同一板跑影响大不大呢？
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-13 08:23:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
machao8405: 金币+2 2013-03-13 18:04:53
引用回帖:
5楼: Originally posted by machao8405 at 2013-03-13 08:23:16
不同时间点的样品，不在同一板跑影响大不大呢？...

板与板之间是可能造成一定差别，做相对定量的话问题不大。
赞一下 回复此楼
6楼2013-03-13 10:20:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hy_sandra

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by machao8405 at 2013-03-13 08:22:19
内参跟目的基因不在一板做应该就失去内参的意义了吧？...

內參是確保樣本之間模版?舛鹊牟町?性，與目的基因沒有關聯，所以我是覺得不在一起作也沒關係。除非你用了tagman primer設計內參，?K與目的基因在同一管內作用，這樣就可以更使loading error減小，誤差就更小了
赞一下 回复此楼
科研是無止盡的
7楼2013-03-13 16:28:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 machao8405 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭