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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教PCR 产物 的问题，谢谢
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shadowerhua

新虫 (初入文坛)

[交流] 请教PCR 产物 的问题，谢谢 已有3人参与

PCR 的模板 是环状 DNA  ( T4 链接后的DNA), PCR primer 是 这个环状 DNA 的一部分， 请问  产物 是环状 的还是线性的？  和实验室的讨论了一下，因为模板不是 线性的，所以 最后产物不会 是primers cover 的那一段。 因为 是环状的是，所以单一primer 都可以转一圈，不管结合在哪里。

谢谢
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1楼 2013-02-04 16:06:17
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studentg

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
产物怎么可能是环状？用了那么多载体做模板，每次得到的都是所要的片段。
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道法自然，探其精妙。
2楼2013-02-05 04:20:15
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huangguoqing

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
个人意见，仅供参考！
应该是线性的。PCR产物都是线性的，一般DNA聚合酶没有连接活性。
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3楼2013-02-05 11:36:29
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borntowin27

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
鉴于你的描述，想到一下几点：
1.由于你的环状DNA是T4 链接形成的，所以和抽取的质粒DNA是不同的，不仅是超螺旋的差异，期中肯定有部分是没有成环的线性分子，还有是分子间的环状DNA；
2.PCR产物肯定是线性的；
3.引物肯定可以绕环状一圈的，但是这样的产物量很少，因为能够绕一圈的产物是线性扩增的，而且你引物间的片段是指数扩增的；
希望对你有帮助！
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4楼2013-02-05 13:13:18
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