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shadowerhua

新虫 (初入文坛)

[交流] 请教PCR 产物 的问题,谢谢 已有3人参与

PCR 的模板 是环状 DNA  ( T4 链接后的DNA), PCR primer 是 这个环状 DNA 的一部分, 请问  产物 是环状 的还是线性的?  和实验室的讨论了一下,因为模板不是 线性的,所以 最后产物不会 是primers cover 的那一段。 因为 是环状的是,所以单一primer 都可以转一圈,不管结合在哪里。

谢谢
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studentg

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
产物怎么可能是环状?用了那么多载体做模板,每次得到的都是所要的片段。
道法自然,探其精妙。
2楼2013-02-05 04:20:15
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huangguoqing

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
个人意见,仅供参考!
应该是线性的。PCR产物都是线性的,一般DNA聚合酶没有连接活性。
3楼2013-02-05 11:36:29
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borntowin27

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
鉴于你的描述,想到一下几点:
1.由于你的环状DNA是T4 链接形成的,所以和抽取的质粒DNA是不同的,不仅是超螺旋的差异,期中肯定有部分是没有成环的线性分子,还有是分子间的环状DNA;
2.PCR产物肯定是线性的;
3.引物肯定可以绕环状一圈的,但是这样的产物量很少,因为能够绕一圈的产物是线性扩增的,而且你引物间的片段是指数扩增的;
希望对你有帮助!
4楼2013-02-05 13:13:18
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