应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 提不出质粒的问题
51/1返回列表
查看: 2145  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

deepocean123

新虫 (初入文坛)

[求助] 提不出质粒的问题

本人菌落PCR成功的筛出了菌，将阳性菌挑出来摇菌也能摇起来，但是提不出质粒来或者浓度特别低，这是为什么呢？我换了不同的样，提了好几次了，就是不行。我用的是克隆载体--pEASY。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-28 08:23:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deepocean123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by weebug at 2013-01-29 09:13:24
或是那质粒在每一菌体里只有一两份而已。

如果是这个问题那怎么解决？
赞一下 回复此楼
7楼2013-01-30 09:33:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

weebug

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看在LB里长你的菌株，扩增质粒量。或加入抗生素。当没筛选环境时，菌株通常会把质粒排除。
赞一下 回复此楼
天蓝蓝兮日头晒
2楼2013-01-28 15:04:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deepocean123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by weebug at 2013-01-28 15:04:14
看在LB里长你的菌株，扩增质粒量。或加入抗生素。当没筛选环境时，菌株通常会把质粒排除。

摇菌的时候是用的LB氨苄抗性的液体培养基，挑出来之前的菌落是长在含有氨苄抗性的LB固体培养基的。我这个应该是算筛选环境吧~？
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-28 23:01:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

putine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR用的引物是载体的还是载体加片段的？会不会是假阳性。你说提出的质粒浓度特别低，可以做测序或者酶切吗？
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-29 01:03:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +5 ZVVZ13 2026-04-08 5/250 2026-04-09 10:13 by 逆水乘风
[考研] 求调剂 +3 猪肉墩粉条cc 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:05 by 猪肉墩粉条cc
[考研] 314求调剂 +11 wakeluofu 2026-04-09 11/550 2026-04-09 09:21 by w虫虫123
[考研] 材料与化工专硕306分找合适调剂 +27 沧海轻舟e 2026-04-06 28/1400 2026-04-08 22:06 by wdyheheeh
[考研] 生物学308分求调剂（一志愿华东师大）做过分子实验 +6 相信必会光芒万� 2026-04-07 7/350 2026-04-08 16:49 by tjzhao
[考研] 复试调剂 +9 春日来信- 2026-04-03 9/450 2026-04-07 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 293求调剂 +3 勇远库爱314 2026-04-06 3/150 2026-04-07 11:15 by hugr
[考研] 工科370求调剂 +3 溏心煎鸡蛋 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:55 by 这是一个无聊的�
[考研] 0857大类环境工程B区求调剂 +3 龚禹铭 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +10 Hll胡 2026-04-04 10/500 2026-04-05 20:09 by nepu_uu
[考研] 301求调剂 +3 XYPLR 2026-04-05 4/200 2026-04-05 19:07 by XYPLR
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +6 cs0106 2026-04-05 6/300 2026-04-05 16:34 by imissbao
[考研] 工科求调剂 +15 11ggg 2026-04-03 15/750 2026-04-05 16:24 by zzx2138
[考研] 085600调剂 +4 1amJJ 2026-04-02 4/200 2026-04-04 21:53 by hemengdong
[考研] 085601，一志愿厦大334复试被刷求调剂 +13 曾仰之 2026-04-03 15/750 2026-04-04 20:13 by dongzh2009
[考研] 368求调剂 +5 今华习 2026-04-03 7/350 2026-04-04 18:47 by imissbao
[考研] 材料专业383求调剂 +8 郭阳阳阳成 2026-04-03 8/400 2026-04-04 10:29 by Rednal.
[考研] 317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂 +6 YinTai 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:30 by 无际的草原
[考研] 322求调剂 +4 FZAC123 2026-04-03 4/200 2026-04-03 20:55 by zhq0425
[考研] 296求调剂 +4 sdhu 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:29 by baoball
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭