应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot p-erk
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
21/1返回列表
查看: 979  |  回复: 1
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

nalanyuhang

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot p-erk

最近实验要做western blot 测erk、p-erk加药后含量变化。
实验室用的RIPA裂解液配方为：50mM Tris-HCl、150mM NaCl、1mMEDTA、1% TritonX-100、1%脱氧胆酸钠、0.1% SDS。蛋白酶抑制剂用的是PMSF，现在想问一下有没有做过类似实验的帮我看一下配方能提出我想要的蛋白吗？是不是还应该加磷酸酶抑制剂？是的话应该加什么物质，浓度是多少？还有就是我是western新手，测磷酸化蛋白有没有什么注意事项啊，希望有做过的战友帮忙分享点宝贵经验，感激不尽！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
孝文要加油
1楼 2013-01-10 18:05:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

porphybaby

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PMSF可能不足以抑制所有蛋白酶的活性。

建议你去买一个罗氏的产品 叫 Roche complete，Protease Inhibitor Cocktail, EDTA-free. 具体什么名字我忘了。
它是一种混合片剂，可以溶在裂解中，抑制多种蛋白酶的活性。

好像现在出了一款升级版，里头就加了 磷酸酶抑制剂的。 但这种cocktail 药片比较贵，你可以问问那些代理公司有没有散装的卖。

然后你注意在样品处理的时候要冰浴，一定要在冰上进行，保持低温。还有
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-10 18:50:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nalanyuhang 的主题更新
21/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 320求调剂 +3 一样圆 2026-04-04 3/150 2026-04-04 22:29 by 啵啵啵0119
[考研] 081700，311，求调剂 +11 冬十三 2026-04-04 11/550 2026-04-04 22:24 by 啵啵啵0119
[考研] 材料科学与工程调剂 +19 深V宿舍吧 2026-03-30 20/1000 2026-04-04 22:13 by hemengdong
[考研] 0703总分331求调剂 +9 ZY-05 2026-04-04 12/600 2026-04-04 22:10 by ZY-05
[考研] 333求调剂 +12 wfh030413@ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:02 by jj987
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-03-31 5/250 2026-04-04 19:45 by 1753564080
[考研] 321求调剂 +13 认真求上学 2026-04-02 13/650 2026-04-04 18:23 by macy2011
[考研] 320分人工智能调剂 +6 振—TZ 2026-04-03 6/300 2026-04-04 01:05 by Dream007008
[考研] 336求调剂 +8 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-03 19:41 by lijunpoly
[考研] 重庆大学材料与化工085600，初试370+，求求调剂建议 +8 shzhou_ 2026-04-01 9/450 2026-04-03 09:31 by 蓝云思雨
[考研] 学硕化学工程与技术，一志愿中国海洋大学320+求调剂 +8 披星河 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:12 by oooqiao
[考研] 材料专硕322分 +11 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 11/550 2026-04-02 10:52 by lnilvy
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 09:52 by yulian1987
[考研] 08生物与医药专硕初试346找调剂 +6 dianeeee 2026-04-01 7/350 2026-04-02 08:23 by guoweigw
[考研] 379求调剂 +3 ?苦瓜不苦 2026-04-01 3/150 2026-04-01 20:09 by 暮云清寒
[考研] 350求调剂 +7 阿佳～ 2026-03-31 7/350 2026-04-01 16:12 by yanflower7133
[硕博家园] 考研调剂 +5 骆驼男人 2026-04-01 5/250 2026-04-01 14:28 by syjjj0321
[考研] 289求调剂 +7 BrightLL 2026-03-29 7/350 2026-03-31 22:05 by 544594351
[考研] 南京大学化学调剂 +11 景随风 2026-03-29 16/800 2026-03-31 10:14 by herarysara
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +6 Gymno 2026-03-30 6/300 2026-03-31 07:26 by 无际的草原
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭