应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » P-AKT/AKTwestern blot
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 3211  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

华农夏田

铁虫 (正式写手)

[交流] P-AKT/AKTwestern blot 已有1人参与

有没有虫友在做P-AKT/AKTwestern blot的？想做心肌细胞 P-AKT/AKT蛋白表达水平，大家的细胞都是现提蛋白跑胶么？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

缺血再灌注

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
要科研也要生活
1楼 2014-04-28 20:25:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CasGene

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
youlinglyw: 金币+2, 感谢经验分享 2014-05-02 19:14:01
要现提，否则p-AKT会丢失。
在裂解过程中，phosphatase可能会把p-AKT水解掉。
最好的办法就是直接用1XSDS煮了。
赞一下 回复此楼
2楼2014-04-29 13:43:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

华农夏田

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by CasGene at 2014-04-29 13:43:40
要现提，否则p-AKT会丢失。
在裂解过程中，phosphatase可能会把p-AKT水解掉。
最好的办法就是直接用1XSDS煮了。

我是先用RIPA加磷酸酶抑制剂提后再用1XLODING煮，不过还没做过P-AKT的western。
赞一下 回复此楼
要科研也要生活
3楼2014-04-30 16:31:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

华农夏田

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by CasGene at 2014-04-29 13:43:40
要现提，否则p-AKT会丢失。
在裂解过程中，phosphatase可能会把p-AKT水解掉。
最好的办法就是直接用1XSDS煮了。

你们不用RIPA就直接用loading buffer煮？
赞一下 回复此楼
要科研也要生活
4楼2014-04-30 16:32:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CasGene

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 华农夏田 at 2014-04-30 16:32:32
你们不用RIPA就直接用loading buffer煮？...

如果技术高超，可以RIPA+phospho inhibitor
但很多同学做实验不够仔细，导致在收细胞的过程中就去磷酸化了。

直接煮的办法保证他们能做出来。
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-02 18:22:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

华农夏田

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by CasGene at 2014-05-02 18:22:05
如果技术高超，可以RIPA+phospho inhibitor
但很多同学做实验不够仔细，导致在收细胞的过程中就去磷酸化了。

直接煮的办法保证他们能做出来。...

那我的细胞是原代贴壁的，非得加RIPA(冰上)操作加磷酸酶抑制剂，裂解10min直接加1x loading buffer煮，这样做能保证做出来吧？
赞一下 回复此楼
要科研也要生活
6楼2014-05-02 20:54:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CasGene

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 华农夏田 at 2014-05-02 20:54:00
那我的细胞是原代贴壁的，非得加RIPA(冰上)操作加磷酸酶抑制剂，裂解10min直接加1x loading buffer煮，这样做能保证做出来吧？...

应该可以
回复此楼
7楼2014-05-04 10:09:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

华农夏田

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by CasGene at 2014-05-04 10:09:41
应该可以...

昨天仍然没做出来，怀疑是一抗的问题
赞一下 回复此楼
要科研也要生活
8楼2014-05-05 11:37:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 华农夏田 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工371求调剂 +14 陪琳看海 2026-04-04 15/750 2026-04-06 06:59 by houyaoxu
[考研] 化学调剂求助 +7 LULONG1 2026-04-03 7/350 2026-04-06 06:41 by houyaoxu
[考研] 308求调剂 +11 倘若起风了呢 2026-04-05 11/550 2026-04-05 23:21 by 来看流星雨10
[考研] 301求调剂 +3 细胞相关蛋白 2026-04-03 3/150 2026-04-05 21:07 by 学员8dgXkO
[考研] 电子信息调剂交叉学科有推荐吗 +6 jhtfeybgj 2026-04-01 9/450 2026-04-05 11:13 by 猪会飞
[考研] 353求调剂 +10 MayUxw1 2026-04-03 10/500 2026-04-05 09:23 by 无际的草原
[考研] 材料工程310专硕调剂 +13 捞捞我…. 2026-04-04 14/700 2026-04-05 09:01 by 来看流星雨10
[考研] 考研调剂 +11 小sun要好运 2026-04-04 11/550 2026-04-05 08:02 by qlm5820
[考研] 288环境专硕,求调材料方向 +13 lllllos 2026-04-04 14/700 2026-04-04 23:34 by lqwchd
[论文投稿] 求文献 5+3 ys879651$ 2026-04-02 3/150 2026-04-04 17:22 by bobvan
[考研] 22408，264求调剂 +3 ywh729 2026-04-03 4/200 2026-04-04 11:04 by ywh729
[考研] 0710生物学336分求调剂 +6 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-04 10:10 by kiyy
[考研] 387求调剂 +4 爱吃片豆土 2026-04-03 5/250 2026-04-04 08:10 by 岸上的一条鱼
[考研] 五邑大学土木工程招调剂生2026 +3 wyutj 2026-03-31 4/200 2026-04-03 18:21 by zengxj_7201
[考研] 282求调剂 不挑专业 求收留 +7 Yam. 2026-03-30 8/400 2026-04-03 14:12 by zhangdingwa
[考研] 0805求调剂 +8 是水分 2026-03-31 8/400 2026-04-02 10:46 by guanxin1001
[考研] 08生物与医药专硕初试346找调剂 +6 dianeeee 2026-04-01 7/350 2026-04-02 08:23 by guoweigw
[考研] 307分求调剂 +14 (o~o) 2026-03-31 15/750 2026-04-01 20:43 by longlotian
[考研] 环境工程调剂 +9 hyzzzzzzz. 2026-04-01 9/450 2026-04-01 14:20 by salamander`
[考研] 江苏苏北高校诚邀调剂同学 +3 zzll406 2026-03-31 3/150 2026-03-31 16:54 by 及时行乐fan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭