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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】Northern blot
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

[交流] 【求助/交流】Northern blot 已有11人参与

请教有做过Northern blot的高手，在RNA转膜过程中一般都是用20*SSC
，那么SSC中的柠檬酸钠和氯化钠的具体功能是什么，为什么不用2*或其他倍的SSC进行转膜呢？恳请各位高手解答！
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麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起，么有鱼丸粗面。。那，我要鱼丸么有鱼丸那，我要粗面…………么有粗面那，我要鱼丸粗面……………………
1楼 2010-07-12 14:03:49
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠
引用回帖:
Originally posted by sulining at 2010-08-18 10:42:50:
呵呵，好的，你们在哪个公司购买的地高辛呢，Northern试验
做起来容易吗

我们用的是Roche的试剂盒，其实只要你的RNA提取没有问题，在跑胶的时候不降解，一旦转到膜上，RNA与尼龙膜交联后，是不会有什么问题了！主要是样品的质量和转膜的效率！
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5楼2010-08-18 10:51:58
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sulining

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你好，你有没有做过反向Northern杂交啊，我想和你交流一下
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2楼2010-08-18 10:30:16
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠
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Originally posted by sulining at 2010-08-18 10:30:16:
你好，你有没有做过反向Northern杂交啊，我想和你交流一下

你好！反向Northern我们没有做过！我看了一下简单介绍，反向Northern是把
RNA反转成cDNA后转膜，用RNA标记的同位素作为探针，这个感觉与Southern
有点类似，因为我们是用地高辛做的，不知道和同位素有没有太多区别，不过
有什么问题我们可以互相讨论一下！呵呵！
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3楼2010-08-18 10:38:55
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sulining

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呵呵，好的，你们在哪个公司购买的地高辛呢，Northern试验
做起来容易吗
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4楼2010-08-18 10:42:50
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sulining

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呵呵，谢谢，其实我们是把RNA反转成CDNA来做，其余的你们做的一样
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6楼2010-08-18 10:55:12
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sulining

新虫 (初入文坛)
Roche的试剂盒，不是有好几种吗》？怎么来选择自己需要的呢，
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7楼2010-08-18 10:55:59
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠
引用回帖:
Originally posted by sulining at 2010-08-18 10:55:59:
Roche的试剂盒，不是有好几种吗》？怎么来选择自己需要的呢，

我们用的是地高辛2 是通过x光片感光，地高辛1是化学显色的！
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麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起，么有鱼丸粗面。。那，我要鱼丸么有鱼丸那，我要粗面…………么有粗面那，我要鱼丸粗面……………………
8楼2010-08-18 13:01:57
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sulining

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谢谢提供的信息，那你觉得哪种效果更好呢
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9楼2010-08-19 16:52:45
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠
引用回帖:
Originally posted by sulining at 2010-08-19 16:52:45:
谢谢提供的信息，那你觉得哪种效果更好呢

用试剂盒2比较方便，可以按照自己的需要调整曝光时间
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麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起，么有鱼丸粗面。。那，我要鱼丸么有鱼丸那，我要粗面…………么有粗面那，我要鱼丸粗面……………………
10楼2010-08-19 20:18:26
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