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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

[交流] 【求助/交流】Northern blot 已有11人参与

请教有做过Northern blot的高手,在RNA转膜过程中一般都是用20*SSC
,那么SSC中的柠檬酸钠和氯化钠的具体功能是什么,为什么不用2*或其他倍的SSC进行转膜呢?恳请各位高手解答!
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麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起,么有鱼丸粗面。。那,我要鱼丸么有鱼丸那,我要粗面…………么有粗面那,我要鱼丸粗面……………………
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

引用回帖:
Originally posted by sulining at 2010-08-18 10:42:50:
呵呵,好的,你们在哪个公司购买的地高辛呢,Northern试验
做起来容易吗

我们用的是Roche的试剂盒,其实只要你的RNA提取没有问题,在跑胶的时候不降解,一旦转到膜上,RNA与尼龙膜交联后,是不会有什么问题了!主要是样品的质量和转膜的效率!
麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起,么有鱼丸粗面。。那,我要鱼丸么有鱼丸那,我要粗面…………么有粗面那,我要鱼丸粗面……………………
5楼2010-08-18 10:51:58
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sulining

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你好,你有没有做过反向Northern杂交啊,我想和你交流一下
2楼2010-08-18 10:30:16
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

引用回帖:
Originally posted by sulining at 2010-08-18 10:30:16:
你好,你有没有做过反向Northern杂交啊,我想和你交流一下

你好!反向Northern我们没有做过!我看了一下简单介绍,反向Northern是把
RNA反转成cDNA后转膜,用RNA标记的同位素作为探针,这个感觉与Southern
有点类似,因为我们是用地高辛做的,不知道和同位素有没有太多区别,不过
有什么问题我们可以互相讨论一下!呵呵!
麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起,么有鱼丸粗面。。那,我要鱼丸么有鱼丸那,我要粗面…………么有粗面那,我要鱼丸粗面……………………
3楼2010-08-18 10:38:55
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sulining

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
呵呵,好的,你们在哪个公司购买的地高辛呢,Northern试验
做起来容易吗
4楼2010-08-18 10:42:50
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sulining

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
呵呵,谢谢,其实我们是把RNA反转成CDNA来做,其余的你们做的一样
6楼2010-08-18 10:55:12
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sulining

新虫 (初入文坛)

Roche的试剂盒,不是有好几种吗》?怎么来选择自己需要的呢,
7楼2010-08-18 10:55:59
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

引用回帖:
Originally posted by sulining at 2010-08-18 10:55:59:
Roche的试剂盒,不是有好几种吗》?怎么来选择自己需要的呢,

我们用的是地高辛2 是通过x光片感光,地高辛1是化学显色的!
麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起,么有鱼丸粗面。。那,我要鱼丸么有鱼丸那,我要粗面…………么有粗面那,我要鱼丸粗面……………………
8楼2010-08-18 13:01:57
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sulining

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
谢谢提供的信息,那你觉得哪种效果更好呢
9楼2010-08-19 16:52:45
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

引用回帖:
Originally posted by sulining at 2010-08-19 16:52:45:
谢谢提供的信息,那你觉得哪种效果更好呢

用试剂盒2比较方便,可以按照自己的需要调整曝光时间
麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起,么有鱼丸粗面。。那,我要鱼丸么有鱼丸那,我要粗面…………么有粗面那,我要鱼丸粗面……………………
10楼2010-08-19 20:18:26
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