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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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danny0426

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我用的是生物素的,KPL公司的,我的师兄他们都做的不错,我的做了好几遍了,一直没有理想的结果,做完一次郁闷一次!
11楼2010-08-21 15:32:07
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foreverjohn

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by mgangle at 2010-08-19 20:18:26:

用试剂盒2比较方便,可以按照自己的需要调整曝光时间

试剂盒2需要X光胶片,是不是还需要专门开片子的仪器,你们是用的什么仪器呢?我正在选择1还是2,化学发光是不是对最后直接拍照就可以了?我想做Southern,将酵母染色体电泳分离后再用探针印记,不知道是否有这方面的经验供分享!
12楼2010-08-21 16:42:30
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linxi8579

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by mgangle at 2010-08-18 10:38:55:



你好!反向Northern我们没有做过!我看了一下简单介绍,反向Northern是把
RNA反转成cDNA后转膜,用RNA标记的同位素作为探针,这个感觉与Southern
有点类似,因为我们是用地高辛做的,不知道和同位素有没有 ...

地高辛行吗,灵敏度好吗,我要做小RNA的northern,老师建议用同位素,但是那东西辐射啊,巨不愿意做。
13楼2010-08-21 22:04:46
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roxxane

新虫 (初入文坛)

如何标记反转出的cDNA第一链呢


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
想请问各位大侠,用什么方法反转出来的cDNA用DIG标记上呢,我用klenow酶试过没有标记上。

[ Last edited by roxxane on 2010-11-25 at 21:20 ]
14楼2010-11-25 21:15:11
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vickie20

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
即将要做northern blot了不知道各位大侠能提供啥注意事项不?
15楼2011-08-04 10:40:09
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longlikun

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
正在做这个,参与讨论。
转膜时候,胶是不是不能加EB啊?
16楼2011-08-04 11:27:53
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

引用回帖:
16楼: Originally posted by longlikun at 2011-08-04 11:27:53:
正在做这个,参与讨论。
转膜时候,胶是不是不能加EB啊?

可以加,用双蒸水和低浓度NaOH冲洗就OK了,可以参照分子克隆第三版碱转法
麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起,么有鱼丸粗面。。那,我要鱼丸么有鱼丸那,我要粗面…………么有粗面那,我要鱼丸粗面……………………
17楼2011-08-04 13:25:30
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xyf-1988

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by mgangle at 2010-08-18 10:51:58
我们用的是Roche的试剂盒,其实只要你的RNA提取没有问题,在跑胶的时候不降解,一旦转到膜上,RNA与尼龙膜交联后,是不会有什么问题了!主要是样品的质量和转膜的效率!...

你好,我能问问你用roche的试剂盒时,你们在标记探针效率时阳控和样本能出几个点呢?
走自己的路,努力做好自己。
18楼2013-08-06 18:35:57
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

引用回帖:
18楼: Originally posted by xyf-1988 at 2013-08-06 18:35:57
你好,我能问问你用roche的试剂盒时,你们在标记探针效率时阳控和样本能出几个点呢?...

请问你说的是探针效率检测吗?一般点1 10-1,10-2,10-3,10-4就足够了
麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起,么有鱼丸粗面。。那,我要鱼丸么有鱼丸那,我要粗面…………么有粗面那,我要鱼丸粗面……………………
19楼2013-08-08 13:43:07
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kong870608

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by mgangle at 2010-08-19 20:18:26
用试剂盒2比较方便,可以按照自己的需要调整曝光时间

你好,我也在做Northern blot 但是一直不出结果。向你求助。方便留下你的QQ号吗。谢谢
20楼2013-10-31 18:22:40
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