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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 做电泳时蛋白条带出不来？
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pobiok

新虫 (初入文坛)

[求助] 做电泳时蛋白条带出不来？

请教一下，为什么做SDS-PAGE时蛋白的条带出不来，蛋白MARK也出不好?用的是10%的胶，试剂都是新配的.

IMG_20130109_双标.jpg
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1楼 2013-01-10 12:05:07
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by pobiok at 2013-01-10 14:17:26
我用的配方跟别的实验室是一样的，别的实验室能跑出来。我跑的时候很奇怪，前面几个小时没问题，3-4小时后就分离胶就会有气泡，不知道为什么？...

有气泡主要是电泳时产热，buffer里有SDS，有时候就会出现所谓的气泡。SDS-PAGE对温度没有严格的要求，有气泡产生也没什么大事。当然能够控制不产生很多热更好。你跑的是多大的胶，电压多少？此外，蛋白上样量是多少？
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8楼2013-01-11 08:42:31
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lizhijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-01-11 07:59:24
marker跑的不好，可以肯定的原因之一是胶凝的不好。至于其他原因，与你配方和电泳条件有关！
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海上生明月，天涯共此时！
2楼2013-01-10 12:22:42
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pobiok: 金币+1, ★有帮助 2013-01-10 14:17:53
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-01-11 07:59:38
marker跑得不行，觉得你的胶或者电泳条件有问题。再确定一下配方是否正确。胶的前沿不整齐，胶凝的速度是否过快或者过慢？实验室有其他人跑胶吗？效果怎么样？此外，不知道你的胶染了多久，至少脱色不完全。
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3楼2013-01-10 12:46:06
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pobiok

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-10 12:46:06
marker跑得不行，觉得你的胶或者电泳条件有问题。再确定一下配方是否正确。胶的前沿不整齐，胶凝的速度是否过快或者过慢？实验室有其他人跑胶吗？效果怎么样？此外，不知道你的胶染了多久，至少脱色不完全。

我用的配方跟别的实验室是一样的，别的实验室能跑出来。我跑的时候很奇怪，前面几个小时没问题，3-4小时后就分离胶就会有气泡，不知道为什么？
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4楼2013-01-10 14:17:26
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