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矛盾聚合体

铜虫 (初入文坛)

[求助] 已知基因序列,要用PCR克隆该基因,模板从哪里来?

 假设我已经得到基因序列了,我也知道下一步要PCR,设计引物什么的,但是我就是不知道模板从哪里来(我手上没有现成的)。。。是直接捣碎一个人的细胞提取全DNA吗?这样的话,模板未免也太多太杂了吧,得浪费多少核苷酸啊。。。
 我的想法是,把DNA提取出来以后用限制酶切了,然后电泳,比如目的基因是500bp的,那我就选500bp的区段电泳出来的DNA片段作PCR。。。可是,即便是这样,也还是含有很多很多的片段啊,而且限制酶切出来的位点正好在我要的基因上怎末办?小弟只是处在理论阶段的大一生,从来没有动手操作过,提取的想法未免幼稚,请各位见谅
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看天

木虫 (知名作家)

提基因组 不需要酶切 直接用引物PCR PCR特异性很好 智慧P出引物之间的特定序列 我不明白你想什么
戒嗔怒以养肝气,省言语以养神气,多读书以养质气,顺时令以养元气,不拘节以养大气,观天变以养灵气,莫强求规于运气。
10楼2013-01-06 19:26:23
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