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wangxb1233

木虫 (正式写手)

[交流] qRTPCR内参基因是不是每次都要做 已有6人参与

原来做qRT实验的时候总是把目的基因和内参基因同时做,目的基因做三次重复,内参基因做3次重复,如果下次做另外一个基因还做这批样品的时候,目的基因3次重复,同样的内参再做3次,感觉同样的样品如果放置的时间不长,以后内参基因是不是就不用再重复了呢,是否可以用第一次的结果呢?大家什么意见。。
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heroyl

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
理论上是可以的,我也是这么干的!
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
2楼2012-12-25 13:21:26
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wangxb1233

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by heroyl at 2012-12-25 13:21:26
理论上是可以的,我也是这么干的!

感觉如何?
http://bbs.werdoc.com/?u=2143
3楼2012-12-25 15:50:26
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我是每次做内参的。一般情况下的重复性不错,不过冻化过的cDNA做出的CT数还是会有一点差别的。
4楼2012-12-25 15:51:55
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wangxb1233

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-25 15:51:55
我是每次做内参的。一般情况下的重复性不错,不过冻化过的cDNA做出的CT数还是会有一点差别的。

看来最好不要反复冻融!
http://bbs.werdoc.com/?u=2143
5楼2012-12-25 15:58:05
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gdj363702043

金虫 (正式写手)

不需要
加油努力
6楼2012-12-25 16:11:34
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wangxb1233

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by gdj363702043 at 2012-12-25 16:11:34
不需要

相当肯定啊!
http://bbs.werdoc.com/?u=2143
7楼2012-12-25 17:08:55
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lovelydong

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
建议每次都做,数据更有说服力。
8楼2012-12-25 17:11:12
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heroyl

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by wangxb1233 at 2012-12-25 15:50:26
感觉如何?...

还可以吧。确实有的情况下样本太多一直做内参一方面挺烦的,另一方面也挺浪费的!
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
9楼2012-12-26 09:08:38
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wanhj

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
还是奥做的
减小样品批次间的误差
10楼2012-12-26 09:31:07
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