24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 603  |  回复: 3

xy656691

金虫 (正式写手)

[求助] 关于引物设计的一些问题

在酶切位点加保护碱基时,是只在酶切位点的5'端加保护碱基还是酶切位点的两端都加呢?
假如我要设计A基因的引物,那么我设计引物时,是以A的全基因组作为模板还是CDNA,亦或是CDS序列,这三种序列有什么区别?什么条件下用何种序列呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
保护碱基是在引物的5'加的,根据PCR的原理,引物5'端和模板不需要很好的互补,所以可以引入酶切位点和保护碱基。引物的3'端最好和模板完全互补才能和模板很好的anealing。
引物设计以什么序列为模板要看你做PCR的目的是希望扩增什么,具体情况具体分析。
2楼2012-12-22 11:58:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xy656691

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-22 11:58:13
保护碱基是在引物的5'加的,根据PCR的原理,引物5'端和模板不需要很好的互补,所以可以引入酶切位点和保护碱基。引物的3'端最好和模板完全互补才能和模板很好的anealing。
引物设计以什么序列为模板要看你做PCR的目 ...

嗯,谢谢。酶切位点是一段碱基序列,在引物的5'端,那所加的保护碱基是在酶切位点序列的5'端还是3'端?
3楼2012-12-22 12:58:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by xy656691 at 2012-12-22 12:58:03
嗯,谢谢。酶切位点是一段碱基序列,在引物的5'端,那所加的保护碱基是在酶切位点序列的5'端还是3'端?...

保护碱基加在酶切位点的5'端。就是5'-XXXX-酶切位点-正常引物序列-3’
4楼2012-12-23 00:23:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xy656691 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +8 曼111 2026-03-24 9/450 2026-03-28 07:58 by YYYYX1234
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +4 手机用户 2026-03-26 4/200 2026-03-28 07:17 by mmm just
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +15 荷包蛋hyj 2026-03-26 15/750 2026-03-28 04:13 by fmesaito
[考研] 275求调剂 +10 Micky11223 2026-03-25 13/650 2026-03-27 22:42 by Micky11223
[考研] 085600,材料与化工321分,求调剂 +9 大馋小子 2026-03-27 9/450 2026-03-27 14:30 by mmm just
[考研] 299求调剂 +6 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 6/300 2026-03-27 12:43 by 果果妈咪
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +4 举个栗子oi 2026-03-24 5/250 2026-03-26 23:15 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +4 柳溪边 2026-03-26 4/200 2026-03-26 21:14 by XPU李庆
[考研] 321求调剂 +5 材料cailiao 2026-03-21 5/250 2026-03-26 20:41 by fmesaito
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程(085601) +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
信息提示
请填处理意见