版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (5031)
>考研 (1416)
>导师招生 (1101)
>休闲灌水 (175)
>文献求助 (153)
>虫友互识 (150)
>硕博家园 (84)
>考博 (74)
>论文投稿 (72)
>基金申请 (56)
>博后之家 (55)
>教师之家 (30)
>论文道贺祈福 (28)
>公派出国 (28)
>找工作 (24)
>招聘信息布告栏 (23)

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xy656691

金虫 (正式写手)

MolEPI: 1
应助: 37 (小学生)
贵宾: 0.248
金币: 1404.8
散金: 772
红花: 12
帖子: 751
在线: 158.2小时
虫号: 1681902
注册: 2012-03-11
性别: GG
专业: 免疫学研究新技术与新方法

[求助] 关于引物设计的一些问题

在酶切位点加保护碱基时，是只在酶切位点的5'端加保护碱基还是酶切位点的两端都加呢？
假如我要设计A基因的引物，那么我设计引物时，是以A的全基因组作为模板还是CDNA，亦或是CDS序列，这三种序列有什么区别？什么条件下用何种序列呢？

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

设计了3条引物，请大家帮我看看是否可用，两个哪个好一些呢？谢谢了！已经有12人回复
做原核表达引物设计的有关问题已经有14人回复
关于pcr引物设计的问题已经有6人回复
引物设计区域选择问题已经有7人回复
大家做RT-qPCR设计引物用的什么软件呀？已经有15人回复
关于引物设计的问题已经有5人回复
引物设计的问题已经有13人回复
引物设计的问题已经有6人回复
引物设计已经有4人回复
关于设计ＧＦＰ的引物设计问题。专家请入内已经有3人回复
——CODEHOP简并引物设计程序的疑惑已经有9人回复
做蛋白体外表达时的引物设计问题！已经有12人回复
请教引物设计的问题已经有6人回复
有关引物设计问题已经有9人回复
【求助/交流】紧急求助~~ 关于简并引物设计 codehop 和genefisher 在线已经有12人回复
【求助/交流】引物设计的序列选择问题已经有9人回复
【求助/交流】关于启动子缺失的引物设计问题已经有4人回复
克隆基因全长引物设计问题已经有32人回复

1楼 2012-12-22 10:00:06

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

引用回帖:

3楼: Originally posted by xy656691 at 2012-12-22 12:58:03
嗯，谢谢。酶切位点是一段碱基序列，在引物的5'端，那所加的保护碱基是在酶切位点序列的5'端还是3'端？...

保护碱基加在酶切位点的5'端。就是5'-XXXX-酶切位点-正常引物序列-3’

赞一下(1人)

回复此楼

4楼2012-12-23 00:23:58

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 4 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

保护碱基是在引物的5'加的，根据PCR的原理，引物5'端和模板不需要很好的互补，所以可以引入酶切位点和保护碱基。引物的3'端最好和模板完全互补才能和模板很好的anealing。
引物设计以什么序列为模板要看你做PCR的目的是希望扩增什么，具体情况具体分析。

赞一下(1人)

回复此楼

2楼2012-12-22 11:58:13

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xy656691

金虫 (正式写手)

MolEPI: 1
应助: 37 (小学生)
贵宾: 0.248
金币: 1404.8
散金: 772
红花: 12
帖子: 751
在线: 158.2小时
虫号: 1681902
注册: 2012-03-11
性别: GG
专业: 免疫学研究新技术与新方法

引用回帖:

2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-22 11:58:13
保护碱基是在引物的5'加的，根据PCR的原理，引物5'端和模板不需要很好的互补，所以可以引入酶切位点和保护碱基。引物的3'端最好和模板完全互补才能和模板很好的anealing。
引物设计以什么序列为模板要看你做PCR的目 ...

嗯，谢谢。酶切位点是一段碱基序列，在引物的5'端，那所加的保护碱基是在酶切位点序列的5'端还是3'端？

赞一下

回复此楼

3楼2012-12-22 12:58:03

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 4 个回答

最具人气热帖推荐 [查看全部]		作者	回/看	最后发表

[考研] 332求调剂 +3	@MZB382400 2026-03-28	3/150	2026-03-28 16:55 by JourneyLucky
[考研] 调剂310 +6	温柔的晚安 2026-03-25	7/350	2026-03-28 16:04 by qq2000
[考研] 求调剂 +6	争取九点睡 2026-03-28	6/300	2026-03-28 14:14 by Ainin_
[考研] 调剂求院校招收 +4	鹤鲸鸽 2026-03-28	4/200	2026-03-28 13:38 by 唐沐儿
[考研] 求化学调剂 +4	wulanna 2026-03-28	4/200	2026-03-28 13:37 by 唐沐儿
[考研] 286求调剂 +12	PolarBear11 2026-03-26	12/600	2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 调剂 +3	好好读书。 2026-03-28	3/150	2026-03-28 12:04 by 王保杰33
[考研] 272求调剂 +7	脚滑的守法公民 2026-03-27	7/350	2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 考研调剂 +9	小蜡新笔 2026-03-26	9/450	2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4	崔wj 2026-03-26	4/200	2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 336材料求调剂 +7	陈滢莹 2026-03-26	9/450	2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 341求调剂 +7	青柠檬1 2026-03-26	7/350	2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 一志愿211 初试270分求调剂 +6	谷雨上岸 2026-03-23	7/350	2026-03-26 18:55 by 不吃魚的貓
[考研] 085602 289分求调剂 +8	WWW西西弗斯 2026-03-24	8/400	2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 0854电子信息求调剂 +7	α____ 2026-03-22	9/450	2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 化工专硕求调剂 +3	question挽风 2026-03-24	3/150	2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3	三水研0水立方 2026-03-23	3/150	2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 333求调剂 +3	ALULU4408 2026-03-23	3/150	2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 328求调剂 +4	LHHL66 2026-03-23	4/200	2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 280分求调剂一志愿085802 +4	PUMPT 2026-03-22	7/350	2026-03-22 22:13 by 星空星月