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yanjiwuluo

新虫 (小有名气)

[求助] Q-pcr熔解曲线

请问各位高手,我初做Q-pcr,跑的线,为什么呢一开始就上升呢。就是CT值2.5左右。还有熔解曲线有两个相近的峰。是不是DNA模板浓度太大了。。。
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yanjiwuluo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by stewart3261 at 2012-12-21 09:00:23
这样的扩增曲线是没有问题的,可以说还不错的。问题是熔解曲线不太好!有杂峰,表明有非特异性的扩增!解决办法,你可以再跑一次,确定引物能不能用。还有确保你RNA的质量!

我提的是DNA,我之前做过一个退火温度的梯度。然后54度是比较好的。怎么用55度Q-pcr时。熔解曲线就不好了
10楼2012-12-21 12:14:47
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查看全部 18 个回答

孙启亮

金虫 (著名写手)

不应该是模板的问题,整理下上图吧
2楼2012-12-20 11:32:35
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yanjiwuluo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-12-20 11:32:35
不应该是模板的问题,整理下上图吧

好欢喜,在别的帖子上看过you。哈哈,好之后我把图传上
3楼2012-12-20 12:33:46
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yanjiwuluo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-12-20 11:32:35
不应该是模板的问题,整理下上图吧

看看我得扩增曲线,跟熔解曲线

1.png



2.png

4楼2012-12-20 17:47:32
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