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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于T载体的疑问，高手指教
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surayuth

禁虫 (初入文坛)
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分子生化实验经验积累

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1楼2012-12-17 14:53:06
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 有帮助！ 2012-12-18 11:33:31
T载体一般不会去磷酸化处理。一般的单酶切后连接会考虑用磷酸化酶去除掉质粒末端的磷酸基团，使其不会发生自连；而片段仍然可以和这样的质粒连接，是因为刚连上时双链DNA只需要一条链连上也是可以的，转进大肠后，通过修复系统将切口连接；或者是以一条完整链为模板复制，另外一条链会修复好。
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5楼2012-12-17 17:53:51
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
因为我们一般使用Taq酶克隆出来的基因两端含有PolyA，这段PolyA序列刚好与T载体两端的PolyT序列互补，这是为什么它们能连接的原因。
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keepon
2楼2012-12-17 16:05:47
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
T-vector的5'端有磷酸基，可以与插入片段的3'端相连。插入片段的5’端是OH基，不能与T-Vector的3’端相连。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-12-17 16:10:10
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surayuth

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
4楼2012-12-17 16:46:35
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