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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】T载体测序
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congyunxy

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】T载体测序 已有5人参与

我的一个两千多的片段连到T载体之后送去测序，结果没测出来，公司给的说法是“双向测序结果均出现重叠峰，测序失败”。请教一下是什么原因。
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1楼 2011-01-20 16:10:20
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该是质粒不纯造成的，将质粒重新转化，挑单克隆再去测。
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Thank-you，so-blue.
2楼2011-01-20 16:26:42
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congyunxy

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-01-20 16:26:42:
应该是质粒不纯造成的，将质粒重新转化，挑单克隆再去测。

这个质粒不纯是由于什么造成的呢？有没有避免或者减少这种影响的方法啊?
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3楼2011-01-20 16:38:32
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real339

金虫 (正式写手)
样品被污染了
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天下没有免费的午餐
4楼2011-01-20 16:39:59
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)
★
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挑单克隆再提质粒，就能避免不纯了，我前段时间测序出现和你一样的问题，后来又挑单克隆测序就测出来了
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共同学习，共同进步，共同提高，加油！
5楼2011-01-20 17:51:30
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
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引用回帖:
Originally posted by congyunxy at 2011-01-20 16:38:32:

这个质粒不纯是由于什么造成的呢？有没有避免或者减少这种影响的方法啊?

可能是之前挑菌时挑的不是单克隆。
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Thank-you，so-blue.
6楼2011-01-20 18:19:02
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
貌似是没有连接进去啊  用特异性引物好好验证下。。。
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
7楼2011-01-21 00:00:16
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