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piaoyidetian

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:如何去研究一个蛋白?

我现在找到一个蛋白,我如何从基因的水平去研究?除了基因水平,我还可以从哪些角度去研究它再植物发育调控中的功能?恳求指导

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starseacow

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先,查各个数据库,看关于这个蛋白都有什么报道,已知哪些信息,再看在其他植物中有没有类似蛋白得到研究,基于这些信息计划实验。当然最简单的,过表达或敲除,看看对植物生长有什么影响。
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2楼2012-12-05 22:08:07
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piaoyidetian

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-12-05 22:08:07
首先,查各个数据库,看关于这个蛋白都有什么报道,已知哪些信息,再看在其他植物中有没有类似蛋白得到研究,基于这些信息计划实验。当然最简单的,过表达或敲除,看看对植物生长有什么影响。

我要研究的是番茄。
我在一篇文献中找到小麦中编码这个蛋白的基因序列,然后去番茄数据库比对,找到了番茄中的这个基因家族。可是,这个家族的基因的同源性特别高,如果我只是去上调或下调其中一个基因的表达有意义吗?
针对这种情况有什么好的解决方法吗?
3楼2012-12-06 10:38:17
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starseacow

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引用回帖:
3楼: Originally posted by piaoyidetian at 2012-12-06 10:38:17
我要研究的是番茄。
我在一篇文献中找到小麦中编码这个蛋白的基因序列,然后去番茄数据库比对,找到了番茄中的这个基因家族。可是,这个家族的基因的同源性特别高,如果我只是去上调或下调其中一个基因的表达有意 ...

看看小麦中都有哪些研究,如果实在没有任何可供参考的信息,那就只能敲除看看了。拟南芥中没有这个基因么?拟南芥中有的话,直接找点T-DNA突变株,种种看呗
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4楼2012-12-06 17:19:16
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starseacow

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyfgood: 金币+10, 应助指数+1, 请楼主酌情采纳! 2012-12-07 10:00:16
关于研究新基因的思路,大概可以参考这个
1 查数据库,一方面找有没有相关工作提供一些可供分析的信息,另一方面比对序列信息,看看在不同物种间是否该蛋白具有某些保守区段,并且在别的物种中是否有一些功能已被确定
2 做突变和过表达株系,设法根据查到的信息找到表现型,确定功能,如果这个基因表达的蛋白参与某些重要的信号途径最好,这样进一步工作比较好开展,深入点探究该基因有哪些调控作用,它表达的蛋白与哪些其他蛋白有相互作用等等。
3 可以用GUS研究一下在不同植物组织和植物生长阶段的表达情况,同时可以连个GFP在表达该蛋白的细胞内看看具体表达位置

对于一个新基因,如果上面几个工作都比较完整可信的做出来,同时在功能上也有一些确认,文章再写的好点,好文章可期
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5楼2012-12-07 01:34:50
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