版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

返回列表

ying_cheng

金虫 (小有名气)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 1886.9
帖子: 80
在线: 58.7小时
虫号: 996441

[交流] 【求助】生物样品中蛋白质怎样才能彻底的除干净啊

有用无水乙醇除蛋白，但是似乎总是除的不够干净，有什么其他的更有效的方法吗？或者用的比例不对？

回复此楼

» 抢金币啦！回帖就可以得到:
查看全部散金贴

1楼2010-12-07 10:49:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

1445118

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 12693.5
帖子: 717
在线: 423.3小时
虫号: 768638

一般用甲醇或乙腈沉淀蛋白，1:1

赞一下

回复此楼

2楼2010-12-07 11:54:49

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

pfizer2001

金虫 (著名写手)

应助: 41 (小学生)
金币: 555
帖子: 1525
在线: 445.8小时
虫号: 369310

常规的用乙腈来沉淀蛋白的，而不是乙醇？而乙腈沉淀蛋白属于比较简单的步骤，更多可能会用SPE来做，你要首先研究你分析化合物的性质，以及基质的性质，尽可能的消除基质效应的影响！

赞一下

回复此楼

3楼2010-12-07 12:36:10

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

scz1985

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 386.1
帖子: 12
在线: 78小时
虫号: 1159121

用有机试剂使蛋白变性，然后过滤沉淀吧，一般用甲醇、乙腈、乙醇

赞一下

回复此楼

4楼2010-12-07 12:55:52

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

冰片

捐助贵宾 (著名写手)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 2030.9
帖子: 1051
在线: 308.8小时
虫号: 1156597

甲醇沉淀肯定是可以的，但是内源性化合物的清除是需要看情况的。
如果是脏器或者组织的话，有两种建议：
1，加6%-8%的高氯酸溶液，优点是除的比较干净，但是样品本身的酸碱度和无机杂质度会有很大的变化，特别是对离子阱检测器的影响很大。
2.，SPE，这是最好的方法，但是对于SPE的选择是必须要注意的，往往是采用极性相反原则。此法的一个特点是定量应用时，对于方法学的考察难度较大。

赞一下

回复此楼

5楼2010-12-07 15:37:58

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

wangfengjuan

金虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 912.1
帖子: 338
在线: 124.1小时
虫号: 902566

引用回帖:

Originally posted by 冰片 at 2010-12-07 15:37:58:
甲醇沉淀肯定是可以的，但是内源性化合物的清除是需要看情况的。
如果是脏器或者组织的话，有两种建议：
1，加6%-8%的高氯酸溶液，优点是除的比较干净，但是样品本身的酸碱度和无机杂质度会有很大的变化，特别是 ...

请问高氯酸对色谱柱的伤害是不是很大？

赞一下

回复此楼

6楼2010-12-11 10:41:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖