应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】生物样品中蛋白质怎样才能彻底的除干净啊
131/1返回列表
查看: 2476  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ying_cheng

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】生物样品中蛋白质怎样才能彻底的除干净啊

有用无水乙醇除蛋白，但是似乎总是除的不够干净，有什么其他的更有效的方法吗？或者用的比例不对？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

药代动力学……

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-12-07 10:49:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1445118

至尊木虫 (正式写手)
一般用甲醇或乙腈沉淀蛋白，1:1
赞一下 回复此楼
2楼2010-12-07 11:54:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pfizer2001

金虫 (著名写手)
常规的用乙腈来沉淀蛋白的，而不是乙醇？而乙腈沉淀蛋白属于比较简单的步骤，更多可能会用SPE来做，你要首先研究你分析化合物的性质，以及基质的性质，尽可能的消除基质效应的影响！
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-07 12:36:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scz1985

新虫 (初入文坛)
用有机试剂使蛋白变性，然后过滤沉淀吧，一般用甲醇、乙腈、乙醇
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-07 12:55:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰片

捐助贵宾 (著名写手)
甲醇沉淀肯定是可以的，但是内源性化合物的清除是需要看情况的。
如果是脏器或者组织的话，有两种建议：
1，加6%-8%的高氯酸溶液，优点是除的比较干净，但是样品本身的酸碱度和无机杂质度会有很大的变化，特别是对离子阱检测器的影响很大。
2.，SPE，这是最好的方法，但是对于SPE的选择是必须要注意的，往往是采用极性相反原则。此法的一个特点是定量应用时，对于方法学的考察难度较大。
赞一下 回复此楼
5楼2010-12-07 15:37:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangfengjuan

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 冰片 at 2010-12-07 15:37:58:
甲醇沉淀肯定是可以的，但是内源性化合物的清除是需要看情况的。
如果是脏器或者组织的话，有两种建议：
1，加6%-8%的高氯酸溶液，优点是除的比较干净，但是样品本身的酸碱度和无机杂质度会有很大的变化，特别是 ...

请问高氯酸对色谱柱的伤害是不是很大？
赞一下 回复此楼
6楼2010-12-11 10:41:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰片

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by wangfengjuan at 2010-12-11 10:41:26:

请问高氯酸对色谱柱的伤害是不是很大？

当然要吹干啊，呵呵
赞一下 回复此楼
7楼2010-12-11 16:53:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

platto

木虫 (著名写手)
ying_cheng(金币+4):效果如何还有待我的实验结果来验证，先派发金币吧 2010-12-13 14:48:03
除蛋白的方法很多的。除了上述以外，还有氯仿+正辛醇沉淀蛋白法，还有物理方法，如半透膜过滤等。
赞一下 回复此楼
8楼2010-12-12 12:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)
超滤啊，凝胶柱啊，效果不错。。。

之前除糖里的杂蛋白，含量太少了（紫外，电泳都无法检测），还没找到方法除去。。
赞一下 回复此楼
9楼2010-12-12 12:38:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ying_cheng

金虫 (小有名气)
内容已删除
回复此楼
10楼2010-12-13 14:46:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ying_cheng

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冰片 at 2010-12-11 16:53:05:

当然要吹干啊，呵呵

高氯酸可以用氮气吹干吗？怎么验证吹干了啊？有没有其他的方法啊？我要测的物质在酸性环境下不稳定呢
赞一下 回复此楼
11楼2010-12-13 14:49:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swt1898

铁虫 (著名写手)
SPE处理吧
回复此楼
12楼2010-12-13 14:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

waterish

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我试过将组织匀浆液进行SPE处理，氮气吹干后用甲醇复溶后进液相分析杂质可多了，峰形不好，怎么回事呢？
赞一下 回复此楼
13楼2012-04-09 23:21:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ying_cheng 的主题更新
131/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +9 小熊joy 2026-03-14 9/450 2026-03-18 04:33 by anny19840123
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-13 5/250 2026-03-17 10:15 by Sammy2
[考研] 286求调剂 +3 lemonzzn 2026-03-16 5/250 2026-03-16 20:43 by lemonzzn
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 326求调剂 +4 诺贝尔化学奖觊� 2026-03-15 7/350 2026-03-16 17:11 by 诺贝尔化学奖觊�
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗？ 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 一志愿中科院，化学方向，295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭