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ying_cheng

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助】生物样品中蛋白质怎样才能彻底的除干净啊

有用无水乙醇除蛋白,但是似乎总是除的不够干净,有什么其他的更有效的方法吗?或者用的比例不对?
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pfizer2001

金虫 (著名写手)


常规的用乙腈来沉淀蛋白的,而不是乙醇?而乙腈沉淀蛋白属于比较简单的步骤,更多可能会用SPE来做,你要首先研究你分析化合物的性质,以及基质的性质,尽可能的消除基质效应的影响!
3楼2010-12-07 12:36:10
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1445118

至尊木虫 (正式写手)


一般用甲醇或乙腈沉淀蛋白,1:1
2楼2010-12-07 11:54:49
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scz1985

新虫 (初入文坛)


用有机试剂使蛋白变性,然后过滤沉淀吧,一般用甲醇、乙腈、乙醇
4楼2010-12-07 12:55:52
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冰片

捐助贵宾 (著名写手)


甲醇沉淀肯定是可以的,但是内源性化合物的清除是需要看情况的。
如果是脏器或者组织的话,有两种建议:
1,加6%-8%的高氯酸溶液,优点是除的比较干净,但是样品本身的酸碱度和无机杂质度会有很大的变化,特别是对离子阱检测器的影响很大。
2.,SPE,这是最好的方法,但是对于SPE的选择是必须要注意的,往往是采用极性相反原则。此法的一个特点是定量应用时,对于方法学的考察难度较大。
5楼2010-12-07 15:37:58
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