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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】生物样品中蛋白质怎样才能彻底的除干净啊
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ying_cheng

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】生物样品中蛋白质怎样才能彻底的除干净啊

有用无水乙醇除蛋白，但是似乎总是除的不够干净，有什么其他的更有效的方法吗？或者用的比例不对？
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1楼 2010-12-07 10:49:14
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pfizer2001

金虫 (著名写手)
常规的用乙腈来沉淀蛋白的，而不是乙醇？而乙腈沉淀蛋白属于比较简单的步骤，更多可能会用SPE来做，你要首先研究你分析化合物的性质，以及基质的性质，尽可能的消除基质效应的影响！
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3楼2010-12-07 12:36:10
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1445118

至尊木虫 (正式写手)
一般用甲醇或乙腈沉淀蛋白，1:1
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2楼2010-12-07 11:54:49
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scz1985

新虫 (初入文坛)
用有机试剂使蛋白变性，然后过滤沉淀吧，一般用甲醇、乙腈、乙醇
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4楼2010-12-07 12:55:52
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冰片

捐助贵宾 (著名写手)
甲醇沉淀肯定是可以的，但是内源性化合物的清除是需要看情况的。
如果是脏器或者组织的话，有两种建议：
1，加6%-8%的高氯酸溶液，优点是除的比较干净，但是样品本身的酸碱度和无机杂质度会有很大的变化，特别是对离子阱检测器的影响很大。
2.，SPE，这是最好的方法，但是对于SPE的选择是必须要注意的，往往是采用极性相反原则。此法的一个特点是定量应用时，对于方法学的考察难度较大。
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5楼2010-12-07 15:37:58
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