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right304

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助】求解释:荧光光谱法研究变性剂对蛋白质构象影响,峰强变而峰位不发生变化的可

用荧光光谱法研究变性剂(脲)对蛋白构象的影响时,不同浓度的变性剂对蛋白荧光光谱的结果是:在中间设定的某一浓度时,相对荧光强度达到峰值,而峰位不变,请问这一现象应该怎么解释?

    变性剂浓度范围已经达到常规使蛋白完全去折叠的浓度,理论上蛋白质去折叠后疏水性氨基酸会完全暴露出来,除荧光强度变化之外,荧光峰位应该有偏移,但试验结果的荧光峰位基本不变,可能是什么原因呢?

    相关文献中,但凡用变性剂处理蛋白时,峰强和峰位都同时会发生变化。恳求有相关经验的虫子们帮忙,给建议,不胜感激!!
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suntong0022

铁虫 (小有名气)


有图吗

引用回帖:
Originally posted by right304 at 2011-03-29 16:35:33:
用荧光光谱法研究变性剂(脲)对蛋白构象的影响时,不同浓度的变性剂对蛋白荧光光谱的结果是:在中间设定的某一浓度时,相对荧光强度达到峰值,而峰位不变,请问这一现象应该怎么解释?

    变性剂浓度范围已经 ...

请问什么叫荧光值最大 而峰位不变?  有图吗?
3楼2011-04-13 08:22:25
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fever366

木虫 (正式写手)


这个不太懂
4楼2011-04-13 09:57:35
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right304

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by suntong0022 at 2011-04-13 08:22:25:
请问什么叫荧光值最大 而峰位不变?  有图吗?

荧光强度,即荧光发射峰强度;峰位即荧光最大发射波长。
理论上峰强和峰位应该会同时变化。

[ Last edited by right304 on 2011-4-13 at 13:50 ]
5楼2011-04-13 12:18:24
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suntong0022

铁虫 (小有名气)


right304(金币+4): 2011-04-16 14:50:11
引用回帖:
Originally posted by right304 at 2011-04-13 12:18:24:
荧光强度,即荧光发射峰强度;峰位即荧光最大发射波长。
理论上峰强和峰位应该会同时变化。

[ Last edited by right304 on 2011-4-13 at 13:50 ]

我是这么理解的,不同的物质,它的发射和吸收波长是固定的,不知道你的荧光分光光度计是什么样的,但是,你在扫描的时候应该在你说的峰位那出现一个最大值吧。你可以试试定波长测一下荧光值。
6楼2011-04-16 14:15:42
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right304

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by suntong0022 at 2011-04-16 14:15:42:
我是这么理解的,不同的物质,它的发射和吸收波长是固定的,不知道你的荧光分光光度计是什么样的,但是,你在扫描的时候应该在你说的峰位那出现一个最大值吧。你可以试试定波长测一下荧光值。

我用的是日本日立F-4500的,我们理解有偏差。
不过,还是谢谢哈
7楼2011-04-16 14:49:43
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王传胜

金虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
这与蛋白质的氨基酸组成有关,对于不含有色氨酸含有酪氨酸的蛋白,变性之后,其荧光强度会增加,而峰位一直会保持在303nm附近,一般不会发生蓝移或者红移。
8楼2011-12-23 17:05:53
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简单回复
zyxme2楼
2011-03-29 16:47   回复  
right304(金币+3): 不要笑而不语哇,请发表高见! 2011-04-01 11:54:28
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