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right304

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】求解释：荧光光谱法研究变性剂对蛋白质构象影响，峰强变而峰位不发生变化的可

用荧光光谱法研究变性剂（脲）对蛋白构象的影响时，不同浓度的变性剂对蛋白荧光光谱的结果是：在中间设定的某一浓度时，相对荧光强度达到峰值，而峰位不变，请问这一现象应该怎么解释？

    变性剂浓度范围已经达到常规使蛋白完全去折叠的浓度，理论上蛋白质去折叠后疏水性氨基酸会完全暴露出来，除荧光强度变化之外，荧光峰位应该有偏移，但试验结果的荧光峰位基本不变，可能是什么原因呢？

    相关文献中，但凡用变性剂处理蛋白时，峰强和峰位都同时会发生变化。恳求有相关经验的虫子们帮忙，给建议，不胜感激！！
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1楼 2011-03-29 16:35:33
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suntong0022

铁虫 (小有名气)
right304(金币+4): 2011-04-16 14:50:11
引用回帖:
Originally posted by right304 at 2011-04-13 12:18:24:
荧光强度，即荧光发射峰强度；峰位即荧光最大发射波长。
理论上峰强和峰位应该会同时变化。

[ Last edited by right304 on 2011-4-13 at 13:50 ]

我是这么理解的，不同的物质，它的发射和吸收波长是固定的，不知道你的荧光分光光度计是什么样的，但是，你在扫描的时候应该在你说的峰位那出现一个最大值吧。你可以试试定波长测一下荧光值。
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6楼2011-04-16 14:15:42
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suntong0022

铁虫 (小有名气)

有图吗

引用回帖:
Originally posted by right304 at 2011-03-29 16:35:33:
用荧光光谱法研究变性剂（脲）对蛋白构象的影响时，不同浓度的变性剂对蛋白荧光光谱的结果是：在中间设定的某一浓度时，相对荧光强度达到峰值，而峰位不变，请问这一现象应该怎么解释？

    变性剂浓度范围已经 ...

请问什么叫荧光值最大 而峰位不变？  有图吗？
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3楼2011-04-13 08:22:25
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right304

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by suntong0022 at 2011-04-13 08:22:25:
请问什么叫荧光值最大 而峰位不变？  有图吗？

荧光强度，即荧光发射峰强度；峰位即荧光最大发射波长。
理论上峰强和峰位应该会同时变化。

[ Last edited by right304 on 2011-4-13 at 13:50 ]
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5楼2011-04-13 12:18:24
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right304

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by suntong0022 at 2011-04-16 14:15:42:
我是这么理解的，不同的物质，它的发射和吸收波长是固定的，不知道你的荧光分光光度计是什么样的，但是，你在扫描的时候应该在你说的峰位那出现一个最大值吧。你可以试试定波长测一下荧光值。

我用的是日本日立F-4500的，我们理解有偏差。
不过，还是谢谢哈
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7楼2011-04-16 14:49:43
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